mleA基因在酿酒酵母中的整合型表达

[目的]进行中国自行筛选的专利菌种酒酒球菌SD-2a(Oenococcus oeni SD-2a)的苹果酸-乳酸酶基因在酿酒酵母中的整合型表达,使葡萄酒生产过程中的酒精发酵和苹果酸-乳酸发酵(malolactic fermentation,MLF)同时进行. [方法]克隆Oenococcus oeni SD-2a的苹果酸-乳酸酶基因mleA,以PGK1强启动子和ADHl终止子为调控元件,以酵母整合型质粒YIp5为载体,构建重组表达质粒pYILmleA,并转化酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)YS59,经筛选鉴定获得酵母转化子YS59/pYILmleA.进行转化子的营养缺陷型和交配型鉴定、菌落PCR鉴定、SDS-PAGE检测及斑点杂交检测,并对酵母转化子培养上清液进行L-苹果酸及L-乳酸含量的HPLC分析,检测目的基因的功能性表达.[结果]转化子的营养缺陷型和交配型鉴定、菌落PCR鉴定表明获得了阳性转化子;SDS-PAGE检测表明获得的转化子表达了目标蛋白,斑点杂交检测表明目的基因整合到受体菌中.模拟发酵表明mleA基因整合到受体菌中后进行了功能性表达,将培养基中的L-苹果酸转化成L-乳酸,使得培养液中的L-苹果酸含量极显著降低.转化子YS59/pYILmleA在添加5 648 mg·-1 L-苹果酸和10%葡萄糖的SD/-Ura培养基中培养4 d,培养液上清中L-苹果酸的剩余含量与空载体转化子YS59/YIp5(对照)差异极显著,苹果酸的相对降低率为20.18%-20.85%.供试的转化子L-乳酸生成量为1 278～1 312 mg·L-1,对照未检出乳酸的生成.[结论]中国自主筛选的专利菌种O.ocni SD-2a的mleA基因的整合型表达质粒构建成功并在酿酒酵母中进行了功能性表达.
本发明公开了一种糯米酱香型白酒的降度方法，它属于白酒制备技术领域。所述的糯米酱香型白酒是由作为主体的糯米酱香型半成品酒经过细沙、硅藻土、净化介质过滤后，与调味酒、浆水按不同体积比例勾调而成，此种降度方法操作简单，且降度后的酒不会出现口感变差，出现苦味等问题，并且能保证酒体的澄清度，还不会对人体造成伤害，是一种能保证酒的醇正口感且安全的降低酒度的方法。
通过多点采样分析研究了贺兰山东麓主要酿酒葡萄产区土壤肥力特征及其空间变异特征.结果表明:贺兰山东麓酿酒葡萄高产土壤与低产土壤肥力差异明显.依赖化肥的低产田,其土壤速效氮、钾含量高于高产田,且变异系数大,速效磷则相反；高产酿酒葡萄园土壤有机质含量比低产园4 g/kg左右,且变异系数小.除风沙土外,贺兰山东麓高产酿酒葡萄园有机质含量应大于18 g/kg,碱解氮50 mg/kg,速效磷大于25 mg/kg,速效钾大于140 mg/kg,全盐含量0.5 mg/kg以下.通过施用有机肥增加土壤有机质含量是获取酿酒葡萄适度高产的最有效途径,过量施用化肥尽管可以使速效性氮磷钾含量达到丰富的水平,但不能实现稳产和高产.
目的 研究流动注射氢化物发生原子吸收光谱法测定铅的最佳条件.方法 将酒中铅以铁氰化钾氧化、硼氢化钾还原生成铅化氢,用原子分光光度计检测.结果 本实验选择载气流量为150 mL/min,硼氢化钾浓度为1.5%,介质0.3%NaOH,氧化时间为25 ℃,20 min(夏季氧化时间可缩短为10 min),0.5%盐酸溶液作为样品和标准溶液的稀释介质调节酸度.本法检出限为0.20 μg/L,相对标准偏差3.0%6.1%,回收率范围96.2%103.8%,平均回收率为100.1%.结论 本方法 简便、重现性好、准确度高、灵敏度好,能满足国家标准的要求.
目的:借鉴国外专利方法研制冰硼散新剂型.方法:将药物细粉、粘附和粘度增强剂、非离子表面活性剂和凡士林分散于液体石蜡中制成糊剂,并以粘着力、吸水值和赋形性为指标优选高分子材料的种类、比例和用量.结果:最佳处方为冰硼散5.0g,羟丙甲纤维素21.0g,卡波姆14.0g,甘油单硬脂酸酯3.0g,凡士林5.0g,液体石蜡加至100.0g.冰硼口腔糊剂对家免试验性口腔溃疡面愈合时间显著快于冰硼散.结论:冰硼口腔糊剂使用方便,治疗口腔溃疡更有效.
试图运用科技传播学方法,重新认识<北直农话报>的农林学术内容、学术价值和在全国所处的地位.认为:该刊为清末学堂所办仅有的两份农学期刊之一和中国北方旱作农业区创办最早的综合性农学刊物;它是中国近现代经由日本传入西方农学这一历史过程的见证;其传入的西方农学具有新的系统性,特别是关于西方啤酒酿造技术、北美水稻生产技术、日本科学选种法等科学实验方法和俄国农业教育体制,以及农作引种、制造、展览和蚕桑、植树造林等实践,在农林科学技术的西学东渐中具有首创性.