黑曲霉糖化酶基因克隆及在酿酒酵母中的表达

为了以酿酒酵母S78为宿主菌异源高效表达糖化酶基因,进一步扩大糖化酶基因在工业生产上的应用.运用RT-PCR法从黑曲霉中克隆得到糖化酶基因(glaA)cDNA,去除其信号肽编码区后的序列重组到酵母表达载体pVT102U/αADH1强启动子下游,并与α因子分泌肽信号序列融合.用PEG/LiAc法将构建的重组表达载体转入酿酒酵母S78菌株,筛选出的转化菌点种到可溶性淀粉平板上培养,用碘染法鉴定重组基因的表达情况.鉴定出了典型水解圈的酵母转化子,转化子接种到YPD培养基中摇瓶培养后,取发酵上清液经SDS-PAGE检测到分子量大小约为80 kDa的目标蛋白带,上清液用DNS法检测其淀粉酶最高酶活为28.86 IU/mL.表明糖化酶基因已在酿酒酵母S78中成功表达并能有效分泌到细胞外.
目的：探析川芎和当归炮制前后的挥发性成分的含量及其组成。方法临界点二氧化碳萃取技术提取当归、川芎取酒炙前后挥发性成分，经气相色谱－质谱联用分析组成。结果酒炙后，当归挥发性成分含量降低2．92％，川芎挥发性成分降低2．34％，P ＜0．05。炮制后二者大部分化学成分均增加，组成上产生变化。结论酒炙可改变川芎、当归中的挥发性物质组成及含量，影响药效。
本实用新型提供一种白酒酿制设备，它包括由上至下分别设置有水冷仓、制冷仓和过滤仓；所述水冷仓上分别设置有进水法兰和出水法兰，所述水冷仓内安装有换热排管；所述换热排管顶部和底部分别设置有上导流罩和下导流罩；所述制冷仓内侧安装有环形盘管；所述过滤仓内部安装有上支撑杆、硅藻土过滤装置和下支撑杆，所述硅藻土过滤装置的顶端套接在上支撑杆上，且硅藻土过滤装置的底端卡接在所述下支撑杆上，所述过滤仓的底部中心处设有排酒管。该设备通过水冷仓对酒汽中的热量大部分回收，并将热量回馈到蒸馏机内；节约了能源；同时利用硅藻土过滤出酒中的有机物，解决了低温下成品酒的混浊问题。该装置结构简单，使用方便。
[目的]研究产苯乳酸乳酸菌的筛选与鉴定.[方法]用双层培养基法从传统发酵制品中分离出115株乳酸菌,用双层平板法从中筛选出24株对啤酒酵母具有明显抑菌效果的菌株,然后通过高效液相色谱分析筛选产苯乳酸量最高的菌株,并对筛选的菌株进行形态学观察、生理生化鉴定以及菌株16S rDNA序列的测定与分析.[结果]对初筛的24株菌株发酵液进行高效液相色谱分析得到7株苯乳酸的产量>60 mg/L的菌株,其中菌株P421乳酸菌显示出最高的苯乳酸生产能力,苯乳酸产量可达80.5 mg/L.根据菌株P421的形态特征、生理生化特征和16S rDNA序列分析,将该菌株鉴定为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum).[结论]从传统发酵制品中分离筛选得到1株产苯乳酸的菌株,建立了1种准确筛选苯乳酸生产菌的方法.
高效液相色谱法测定了7种啤酒样品中异α-酸的含量,实验研究了色谱流动相组成、比例及进样量、流速、柱温的色谱条件,得出高效液相色谱测定啤酒中异α-酸的最佳优化条件:流动相为A(1％H3PO4)∶B(ACN∶H2O∶H3PO4=80∶19∶1)=10∶90;检测波长:249nm;流速:1.0mL/min;柱温:30℃:进样量:10μL,测定7种啤酒样品中的异α-酸含量,分别为:青岛啤酒(4.46μg/mL)、燕京啤酒(2.92μg/mL)、蓝带啤酒(1.34μg/mL)、雪花啤酒(0.8μg/mL)、哈尔滨啤酒(1.12μg/mL)、百威啤酒(1.06μg/mL)、崂山啤酒(6.39μg/mL).本实验为啤酒行业评价不同品牌啤酒质量、人们选择喜爱的啤酒风味提供了一种简便快速的检测方法.
为建立干白葡萄酒中重要乙酸酯的生成动力学模型,以爱格丽葡萄为原料,接种酿酒酵母,按常规工艺酿造干白葡萄酒.发酵过程中监测乙醇和乙酸含量变化,并定时取样进行目标香气物质(异戊醇、苯乙醇、乙酸乙酯、乙酸异戊酯和乙酸苯乙酯)的SPME-GC-MS分析,建立目标香气物质的香气活性值变化曲线,同时从经典化学反应动力学角度构建目标香气物质的生成动力学模型.研究结果表明,乙酸异戊酯在发酵过程中表现出香气活性,乙酸苯乙酯仅在最大检出量时表现香气活性,乙酸乙酯检出量一直低于嗅觉阈值.目标香气物质从开始生成至达到最大生成量的含量变化均符合零级动力学模型(R2 ＞0.95,P＜0.001).模型揭示出,乙酸乙酯的生成与乙醇和乙酸具有同时性,乙酸异戊酯和乙酸苯乙酯的生成分别相对于异戊醇和苯乙醇有延滞效应.结合零级动力学模型特征,为增强葡萄酒的花香和果香特征,可尝试在爱格丽葡萄汁发酵旺盛的香气物质半生成期,调控促进乙酸乙酯和乙酸苯乙酯生成.