乙醇耐受性提高的酿酒酵母基因工程菌株的构建

将酿酒酵母转录激活因子Msn4基因置于组成型强启动子PGK下,构建重组整合表达质粒YPKR-Msn4,rDNA介导整合到受体菌酵母工业菌株Y49的染色体中,筛选得到酿酒酵母菌YM-27.该菌过量表达酿酒酵母转录激活因子Msn4基因,乙醇耐受性有较大提高.构建的酿酒酵母工程菌运用在木薯乙醇工业生产中,可克服浓醪发酵中后期酵母菌受高浓度乙醇抑制而发酵活力不足的问题,可应用于乙醇浓醪发酵,为进一步构建具有高潜能的优良菌株奠定基础.
为了提高巨峰冰葡萄酒花色苷含量,改善其色泽,以鲜食葡萄和剌葡萄为巨峰冰葡萄酒酿造原料,研究了巨峰葡萄和刺葡萄按不同比例混合发酵对发酵期间花色苷、总酚、色差、总糖、可溶性固形物、酒精度、pH、总酸、挥发酸等理化指标及酒体感官品评的影响.不同比例刺葡萄混酿组的花色苷含量、总酚含量、色差值显著高于巨峰葡萄组(P＜0.05),混酿1∶1组花色苷含量达到208.50 mg/L;且巨峰葡萄与刺葡萄以1∶1的比例混合发酵时色差值和感官品评分值达到最大,分别为17.16和(78±2.79)分;但不同比例刺葡萄混酿组的总糖、总酸、挥发酸含量与巨峰葡萄组无显著性差异(P≥0.05).巨峰葡萄与剌葡萄以1∶1的比例混酿能很好地改善巨峰冰葡萄酒的色泽和口感,酿制出优质巨峰冰葡萄酒,为刺葡萄及普通红葡萄资源的利用开发提供了理论基础.
[目的] 测试某牌号酒的亚急性毒性.[方法] 选用离乳大鼠80只,雌雄各半.试验设41.8、83.5、167 ml/kg 3个剂量组和阴性对照组,每天给予相应浓度浓缩液,按10 ml/kg等容积灌胃,阴性对照组给予20%基酒.连续灌胃30 d,动物自由饮水,进食,每周称一次体重、剩食、计算动物增重、食物利用率,于试验结束后,动物眼球取血进行血液学、血液生化学检查,测肝、脾、肾、睾丸或卵巢体比,并做肝、脾、肾、肠的病理组织学检查.[结果] 某牌号酒经30天喂养试验后,各组动物生长发育良好,活动、进食、排便均未见异常.各剂量组动物增重和食物利用率与阴性对照组相比较,经方差分析,差异无显著性.3个剂量组的白蛋白、总蛋白、甘油三脂、总胆固醇、谷丙转氨酶、尿素氮、肌肝、血糖、与阴性对照组相比较,差异均无显著性.各剂量组的肝、脾、肾、睾丸或卵巢称重和脏器系数与阴性对照组相比较,差异无显著性.血象检查结果也表明3个剂量组的血色素、红细胞数、血小板数、白细胞数及分类及对照组相比较,差异均无显著性.病理组织学检查各剂量组的肝、肾、胃、肠未见毒性病理改变,与对照组相比,差异无显著性.[结论] 受试的某牌号酒经大鼠30天喂养试验,未见毒性反应.
为考察酿酒废水-微藻培育耦合体系的最适磷营养条件,对莱茵衣藻、二形栅藻在单一培养和共培养条件下的生长状况进行了观察,并剖析了对酿酒废水中营养盐的吸收去除效率.采用控制变量法对酿酒废水总磷浓度进行调控,研究了不同磷浓度对微藻的干重、比生长速率、蛋白质含量,以及对总氮(total nitrogen,TN)、总磷(total phosphorus,TP)、化学需氧量(chemical oxygen demand,COD)去除量和去除效率的影响.研究结果表明:莱茵衣藻对磷需求总体上大于二形栅藻对磷需求,当初始总磷浓度为16.40 mg/L,初始氮磷比为2.45时,莱茵衣藻最终生物量达到839.50 mg/L,藻蛋白含量达到53.37 mg/L,对TN、TP、COD的去除率分别为93.48％、91.75％、67.90％;二形栅藻生物量最高达到650.00 mg/L,藻蛋白含量达到131.04 mg/L,对TN、TP、COD的去除率分别为95.76％、73.93％、83.43％;而两种藻在共培养条件下,其生长曲线处于单一培养两种微藻下的生长曲线之间,TP、TN的去除率分别为83.66％、95.24％,COD的去除规律与二形栅藻类似.研究发现酿酒废水-微藻培育耦合体系,无论是单一还是共培养体系,酿酒废水总体均能达到地表水环境质量标准(GB3838—2002)的Ⅳ类水总磷要求.
酿酒酵母可通过艾希利(Ehrlich)途径将L-蛋氨酸转化为3-甲硫基丙醇等食品风味成分,本文研究了氨基转移酶及其基因在Ehrlich途径及3-甲硫基丙醇合成代谢的调控作用.从Saccharomyces cerevisiae S288C克隆氨基转移酶ARO8基因,并基于酿酒酵母-大肠杆菌穿梭型表达载体pYES-pgk,构建重组质粒表达载体pYES-pgk-ARO8,PEG/LiAc转化法将其导入S.cerevisiae S288C.结果表明,克隆的ARO8基因全长1503bp,与NCBI GenBank中酿酒酵母芳香族氨基转移酶Ⅰ编码基因ARO8的序列相似度为100％;构建的ARO8基因过表达工程菌S.cerevisiae AR8,其氨基转移酶活力为187U/mL,较野生型S288C菌株的酶活性提高1.63倍;工程菌AR8的摇瓶发酵3-甲硫基丙醇产量为0.76g/L,较野生型S288C提高28.8％.表明氨基转移酶Aro8p及其ARO8基因在S.cerevisiae 3-甲硫基丙醇合成代谢中发挥重要作用,增强其ARO8基因表达,有助于提高3-甲硫基丙醇的产量.
在高海拔、高纬度水利明渠流冰治理中,阻冰索具有良好的适用性,常常成为抗流冰设计的技术选择.传统阻冰索的功能不足与索网结构阻冰索的结构简述; 索网结构阻冰索功能实验设计; 索网结构阻冰索实验结果分析.研究水利渠道流冰控制技术,是确保冰期渠道输水运行安全的需要,也是提高明渠流冰控制设计技术的需要,具有重要的技术和应用意义.