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代谢工程改造酿酒酵母促进L-苯丙氨酸的合成

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2024-07-07 阅读:993
通过代谢工程改造酿酒酵母L-苯丙氨酸合成相关途径,强化L-苯丙氨酸合成并实现胞外积累,为后续深入挖掘酿酒酵母芳香族氨基酸合成和转运机制,利用酿酒酵母生产芳香族氨基酸及其高价值衍生物提供参考.首先对酿酒酵母中心代谢途径和莽草酸途径进行代谢改造,获得1株合成L-苯丙氨酸初步强化菌株,测得胞外L-苯丙氨酸和L-酪氨酸产量分别为2.49和6.54 mg/L.为了进一步增强L-苯丙氨酸的积累,敲除L-苯丙氨酸消耗途径基因ARO10和PDC5.最后,敲除TYR1阻断竞争性L-酪氨酸合成途径,胞外L-苯丙氨酸产量提高至45.40 mg/L,这是目前研究酿酒酵母L-苯丙氨酸从头合成的最高胞外产量.
蓝莓含有大量对人类健康有益的物质,包括抗氧化物、叶酸、鞣酸、抗菌成分和丰富的食用纤维等.另外,蓝莓的果实用途很广,除生食外还可以加工成果汁、果酱、果酒等各种制品.为此,介绍了蓝莓的保健作用及各国栽培发展趋势.
对煎饼发酵面糊中的优势菌种进行富集培养和划线分离,通过菌落形态、颜色、大小等进行初筛,通过生理生化实验、耐受性实验等进行复筛,采用VITEC-2 Compact微生物鉴定仪对其进行初步鉴定.结果表明:从煎饼发酵面糊中分离筛选得到的9株乳酸菌和11株酵母菌中,乳酸菌R2、R8和酵母菌Y8发酵性能良好,经鉴定R2为肠膜明串珠菌、R8为戊糖片球菌、Y8为酿酒酵母,可以作为煎饼专用复合发酵剂用菌.
本实用新型涉及酿酒设施设备领域,尤其是一种酿制酱香型白酒厂房结构。本实用新型的白酒厂的厂房结构,包括发酵窖池区、蒸酒区、摊凉加曲区和堆集发酵区,其特征在于由二层工作区组成,第一层为发酵窖池区和蒸酒区,阵列设有发酵窖池和酒甑;第二层为摊凉加曲区和堆集发酵区,堆集发酵区阵列设有糟醅入窖口,糟醅入窖口与发酵窖池相对应地设置在堆集发酵区的地板上并设有盖板。本实用新型的白酒厂厂房结构在酿制白酒过程中节约土地面积的同时,通过优化工序步骤,改进厂房结构,降低建设成本,便于实现机械化和自动化,节约人力、时间,提高效率和经济效益。
英国著名酒评家约翰·艾塞克为“英国葡萄酒指南奖章”获得者安德鲁·杰佛的《红酒圣经》所做的序言指出:“如果你想要更具有艺术气息、更健康、更有乐趣的人生,何妨花点时间来了解葡萄酒。你不一定要成为品酒家,但是你一定要知道一些基本概念。”的确,您不必成为侍酒师,但是了解一些技巧更能亭受到葡萄酒的风味。
含硫化合物如谷胱甘肽、硫醇、硫化氢、二氧化硫等都是葡萄酒中重要的风味物质,这4类含硫化合物的含量和形态影响着葡萄酒的风味,且两者都与这4类含硫化合物的来源、检测方法及葡萄酒生产工艺有直接或间接的关系,但针对以上方面的结论仍不统一.基于此,本文整理了这4类含硫化合物在葡萄酒中的含量和存在形态、来源、检测方法、贮藏期间的变化及控制方法这5个方面的研究进展.就含量和存在形态而言,谷胱甘肽主要以还原型谷胱甘肽(GSH)的形式存在,含量不高于70 mg.L-1;硫醇以游离态存在,或与金属离子结合,硫醇含量与具体种类相关,数量级从ng.L-1到μtg.L-1不等;硫化氢主要以结合态存在,易与金属离子结合,总含量不高于30 μμg.L-1;二氧化硫常以气体形式或亚硫酸氢根形式存在,或与含羰基化合物结合,总含量为64.8-166.5 mg·L-1.在来源方面,这4类含硫化合物都与发酵期间酿酒酵母的代谢活动有关.谷胱甘肽主要来源于未发酵葡萄汁原料,少部分来源于氨基酸的发酵代谢;硫醇来源于含硫氨基酸、谷胱甘肽的发酵代谢及以硫化氢为底物的化学反应;硫化氢主要源于含硫氨基酸、硫酸盐和亚硫酸盐的发酵代谢;二氧化硫主要来源于外源添加剂,也有少部分源自硫酸盐的发酵代谢.检测这4类含硫化合物时,常采用化学检测方法或光谱法,此类方法检测快速但误差较大;色谱法精确度高,但是样品预处理复杂,仪器昂贵.在贮藏期间葡萄酒中的铁、铜等过渡金属离子和氧气引起的Fenton反应和氧化反应显著影响部分硫醇和硫化氢的含量.最后针对部分含硫化合物带来的异味,可以通过优化原料品质、筛选酿酒酵母菌株、改进二氧化硫添加工艺、添加金属盐等方法降低.在今后的研究中,可从优化检测方法、探究发酵和贮藏陈酿期间含硫化合物变化机理、改进葡萄酒生产环节等方面展开工作.

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