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酿酒葡萄品种SSR-PCR体系的优化与建立

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2024-07-06 阅读:534
以酿酒葡萄品种为原料,研究了聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)体系的主要成分对葡萄简单序列重复(simple sequence repeats,SSR)扩增结果的影响,并确定了各成分的最佳用量.以改良的十六烷基三甲基溴化铵法(hexadecyl trimethyl ammonium bromide,CTAB)从葡萄中提取基因组DNA,通过单因素试验分析SSR-PCR体系中主要成分Mg2+浓度、dNTPs浓度、Taq DNA聚合酶浓度、引物浓度和模板DNA浓度对葡萄SSR-PCR反应体系扩增效果的影响.同时,采用正交优化设计试验确立酿酒葡萄SSR-PCR最佳25μL反应体系为Mg2+浓度为2.5 mmol/L,dNTPs为0.15 mmol/L,Taq DNA聚合酶为1.5U,引物为0.5μmol/L,DNA含量为40 ng/25 μL.通过优化试验的直观分析和方差分析得出PCR体系的主要成分对扩增结果的影响程度依次为:Mg2+> Taq DNA聚合酶>dNTPs>引物>模板DNA.利用此体系对4个酿酒葡萄品种DNA进行SSR-PCR反应体系扩增并进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,结果扩增条带清晰稳定,说明该体系可用于酿酒葡萄品种SSR标记的研究.
采用已有的计算冷量(火用)以及(火用)损失的公式,对实验室用真空闪蒸制取冰浆系统进行了(火用)分析.利用EES软件,对真空闪蒸法冰浆制备系统中的4个关键环节(冷水冰水混合、真空室内喷雾闪蒸、捕水器内蒸汽凝结成霜、制冷机制备低温盐水)进行计算,得出各个环节(火用)损失以及整个系统的(火用)效率.结果表明:实验用真空室内喷雾闪蒸环节的(火用)效率较高,捕水器内蒸汽凝结成霜的(火用)效率较低,制冷机组制备低温盐水(火用)效率最低,(火用)损最大,导致整个系统的(火用)效率相对较低.为了改善真空闪蒸制取冰浆系统的能耗,应对低温盐水制备环节进行优化或采用其他方式替代该环节.
为了得到高产胞外β-葡萄糖苷酶的酿酒酵母(Saccharomycaes cerevisiae)菌株,采用紫外线诱变技术对菌株MQFSM-3进行处理,研究了紫外诱变条件对菌株致死率的影响,并对突变菌株酶活及酶学性质进行评价.结果表明,出发菌株在辐照剂量为3500 μJ/cm2的紫外灯下照射9 min,致死率为81.09%;通过初筛、复筛及多次传代培养,突变菌株UV-45产酶稳定,酶活提高41.64%,该酶最适温度为50℃,在20~50 ℃热稳定性良好;最适pH为5.5,在pH4.0~6.5酶活力相对稳定.
本发明涉及白酒工艺的酿造设备,尤其涉及一种节能高效的白酒酿造设备,包括蒸馏甑、加热灶、冷凝结构、集液罐、缓冲罐和真空泵,在蒸馏过程中,蒸馏甑、冷凝腔、集液罐和缓冲罐依次形成密闭的真空体系,其特征在于:所述加热灶包覆蒸馏甑的底部及周壁,所述冷凝结构包括冷凝管和包覆在冷凝管外部的冷凝套管,所述蒸馏甑的顶部通过回流管连通冷凝管,所述冷凝结构连接集液罐,所述集液罐和所述真空泵之间设有缓冲罐。本发明的优先在于:降低能耗,提高酒精浓度,提升白酒的品质。
水解蛋白液是橘小实蝇蛋白饵剂的核心组成成分,研究利用酶解法从啤酒废酵母中提取水解蛋白的加工工艺.通过正交试验,对水解温度、pH、时间和加酶量4个水解影响因素进行分析,结果显示,最佳工艺条件为pH值6.0,温度50 ℃,时间18 h,加酶量为2.0 mg/mL.室内生物测定的结果表明,水解蛋白液对橘小实蝇的引诱率可达60.00%,其中雌性和雄性的引诱率分别为63.30%和56.70%.总糖与蛋白质含量的比例是影响引诱率的重要因素,当二者之比为200∶ 1时,引诱率最高.
苹果汁发酵常出现发酵迟滞或停滞的现象,影响苹果汁发酵迟滞或停滞的主要原因是酵母的营养问题,即可同化氮源和维生素.为此,本文通过单因素试验研究了磷酸氢二铵(DAP)、硫酸铵、硫胺素、肌醇、烟酰胺、吡哆醇、生物素、泛酸等八种营养素对发酵的影响.结果表明,磷酸氢二铵(DAP)、硫酸铵、硫胺素及生物素的添加都对酵母代谢有显著影响,当添加量分别为400、1200、0.30及0.20mg/L时,酒精度达到最大值,酵母代谢最为旺盛.

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