酿酒酵母及EtpA酿酒酵母基因工程菌对大鼠小肠黏膜结构的影响

为了调查酿酒酵母及EtpA酿酒酵母基因工程菌对大鼠小肠黏膜生长发育状况的影响,120只健康断奶SD大鼠,随机分为空白对照组、酿酒酵母菌组、EtpA酿酒酵母基因工程菌组,分别灌胃生理盐水、酿酒酵母菌液、EtpA酿酒酵母基因工程菌液2mL/只,持续28 d后连续3d灌胃大肠杆菌菌液.分别取7、14、21和28 d及灌胃大肠杆菌后大鼠的十二指肠、空肠、回肠制作石蜡切片,HE染色,显微镜下观察,记录各段小肠绒毛的宽度、长度、隐窝深度及绒毛长度/隐窝深度比值(V/C).结果显示:1)与空白对照组相比,酿酒酵母菌组及EtpA酿酒酵母基因工程菌组的十二指肠绒毛长度、V/C在第21和28天时均显著升高(P＜0.05);空肠绒毛长度、V/C在第28天均极显著升高(P＜0.01)同时隐窝深度显著下降(P＜0.05);回肠v/C在第28天显著升高(P＜0.05);各肠段绒毛宽度均无显著差异(P＞0.05).2)灌胃大肠杆菌后,与EtpA酿酒酵母基因工程菌组相比,空白对照组及酿酒酵母菌组的空肠绒毛长度、V/C均极显著下降(P＜0.01);回肠V/C均显著下降(P＜0.05).结果表明:酿酒酵母和EtpA酿酒酵母基因工程菌均可以促进肠道黏膜发育,提高消化吸收能力;EtpA酿酒酵母基因工程菌对肠道黏膜的保护作用更显著.
以两种细菌(Bacillus subtilis Wl-3、Bacillus subtilis 10160)和三种真菌(毕赤酵母、酿酒酵母和黑曲霉)为出发菌种,菜籽粕为原料,硫代葡萄糖苷(硫苷)降解率和菜籽多肽得率为发酵菜籽粕品质的评价指标,进行单菌、混菌固态发酵实验.结果表明:最优的单菌发酵菌种为枯草芽孢杆菌W1-3;比较枯草芽孢杆菌W1-3的单菌及与其他菌种的双菌和三菌发酵方式,单菌发酵优于混菌发酵.由枯草芽孢杆菌Wl-3发酵所得的菜籽粕,其中多肽、粗蛋白、氨基酸含量有益物质含量分别增加453.47％、10.39％、17.76％,硫苷和植酸两种抗营养物质含量分别降低62.14％和31.58％.
【目的】探索益生性酿酒酵母菌对绵羊瘤胃上皮细胞β-防御素-1（sheep beta-defensin-1, SBD-1）表达的调节作用，为在分子水平上揭示益生菌对防御素的调控机理提供一定的理论基础及依据。【方法】首先将新鲜的绵羊瘤胃组织用 PBS 和抗生素处理后进行瘤胃上皮细胞原代培养，当原代细胞数量长到细胞培养瓶的85%以上时，将细胞传于12孔板用于细胞刺激试验。同时将活化并纯化后的酿酒酵母菌25℃、180 r/min有氧培养48 h后，进行5次平行平板计数试验，根据平板计数的数据处理方法，得到浓度为5.2×108 CFU·mL-1的酿酒酵母菌液，再通过倍比稀释把所得菌液依次稀释成浓度为5.2×107、5.2×106、5.2×105、5.2×104 CFU·mL-1的菌液，用以上不同浓度（5.2×104—5.2×108 CFU·mL-1）的酿酒酵母菌对体外培养的绵羊瘤胃上皮细胞分别进行不同时间（2、4、8、12、24 h）的刺激，并设置对照组用DMEM/F12培养基代替酿酒酵母菌。然后提取总RNA，逆转录为cDNA后，利用实时荧光定量PCR技术和酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测瘤胃上皮细胞中SBD-1表达差异。最后用SAS 9.2软件对数据进行相关差异性分析。【结果】荧光定量PCR结果表明，在各时间组内SBD-1 mRNA的表达量随着菌液浓度的增加均呈先升高后降低的趋势，当菌液浓度为5.2×107 CFU·mL-1时表达量达到最大，并与对照组和其他浓度组相比差异极显著（P＜0.01）。当菌液浓度一定时，SBD-1 mRNA的表达量先是随着刺激时间的延长而呈上升趋势，刺激时间为12 h时SBD-1 mRNA表达量达到峰值，之后呈下降趋势。因此，当浓度为5.2×107CFU·mL-1的菌液刺激瘤胃上皮细胞12 h后，SBD-1基因的表达量达到最高，且与此浓度下其他时间组的表达量相比差异极显著（P＜0.01）。ELISA检测结果显示，SBD-1蛋白表达趋势与SBD-1 mRNA检测结果基本一致。不同浓度的菌液分别刺激绵羊瘤胃上皮细胞2、4、8、12、24 h后均能提高共培养上清中SBD-1蛋白的表达，且与对照组相比存在极显著差异（P＜0.01）。在菌液浓度为5.2×107CFU·mL-1刺激瘤胃上皮细胞12 h后SBD-1蛋白分泌水平达到最高，与此浓度下各时间组相比差异极显著（P＜0.01）。【结论】酿酒酵母菌能够提高绵羊瘤胃上皮细胞SBD-1的表达，且菌液浓度为5.2×107 CFU·mL-1刺激瘤胃上皮细胞12 h后，SBD-1的表达量达到最高。
应用于500 kV双龙变的直流融冰兼SVC系统是浙江省电力公司最新组织研发的融冰技术方案,能为电网提供两种功能,即融冰和动态无功补偿.重点分析了融冰工程施工过程中的相关问题,总结积累施工经验,为融冰方案的优化设计提供借鉴.
运用Interdelta PCR指纹图谱分析技术,对从沙城产区龙眼葡萄相关的葡萄园土壤、酿酒设备和自然发酵过程中分离得到的54株酿酒酵母(Saccharomyce cerevisiae)进行业种水平的区分鉴定,研究不同酿酒酵母的分布和变化规律.结果表明:54株酿酒酵母产生7种指纹图谱,代表7种不同的基因类型,基因型Ⅰ～Ⅶ分别占所分离菌株的31.5%、11.1%、7.4%、42.6%、3.7%、1.85%和1.85%.自然发酵中后期有4种基因类型的酵母菌,酿酒设备表面3种,葡萄园土壤中2种.通过聚类分析软件处理所得数据作出树形图,可直观地看出亚种第Ⅰ和第Ⅳ的亲缘关系最近,而第Ⅶ与其他亚种的亲缘关系最远.
对苹果渣发酵生产蛋白饲料的混合菌配比进行研究.在单菌种发酵实验的基础上,进行双菌种、三菌种不同混合比发酵实验,确定获得蛋白质含量最高的混合菌配比.实验结果表明,最优菌种比例为,黑曲霉∶ 枯草芽孢杆菌∶酿酒酵母=1∶ 1∶ 2时,苹果渣发酵后的粗蛋白质含量为13 5%,较未发酵时的7 2%提高了88%.