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四翅滨藜LRR类受体蛋白激酶基因在酵母中的表达及抗逆分析

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2024-08-09 阅读:367
从四翅滨藜(Atriplex canescens) cDNA 文库中得到一个亮氨酸富集重复序列类受体蛋白激酶(Leucine-rich repeat receptor-like protein kinases,LRR-RLKs)的全长cDNA序列,命名为AcLRR(登录号:JN974247).为研究AcLRR的抗逆功能,将其构建到酵母表达载体pYES-DEST52,并转化到酿酒酵母INVSc1菌株中,获得重组酵母INVSc1 (pYES-AcLRR),对其进行盐、碱、干旱、高温、冷冻和活性氧等胁迫,分析在不同逆境胁迫下的表型特征.实验结果表明,INVSc1 (pYES-AcLRR)在各种胁迫下的存活率明显高于对照,表明AcLRR 基因具有抗NaCl,KCl,NaHCO3,Na2CO3、干旱、高温、冷冻和活性氧等胁迫的能力,特别对冷冻和活性氧表现出明显抗性.由此可推测该基因参与了四翅滨藜的抗逆调控过程.
本发明公开了一种生物纳米白酒及生产方法,本品属轻工业方面的发明。其技术特点:在不改变传统白酒风格的基础上,利用纳米技术的物理特性。经过一系列后序阶段的加工、处理;保留了传统白酒的风格。使白酒得到深一层的熟化。降解有害物质,达到饮酒保健作用。本生物纳米酒为澄清透明。其饮品的生产方法是传统方式与现代纳米技术结合的产物。
本发明公开了一种现场制备白酒装置以及制备方法,属于制备白酒技术领域,现有的瓶装白酒是酒厂批量酿造和蒸馏,技术要求和标准是工业化的不可避免的会伴生出甲醇和杂醇油降低白酒的质量和口感,生产方为迎合消费者的口感需求所以酒研发了一系列的勾兑和调酒工艺进而又加入了一些化学制剂,本发明采用的是纯粮,原酒,不勾兑,无添加和生产过程由消费者自己掌控,让消费者通过购买生产白酒的原料以及小型便携的生产设备自行生产出货真价实的白酒,让饮者看见粮食变成就的过程从根源上杜绝勾兑酒和假酒。
厚壳贻贝(Mytilus coruscus)黏附蛋白分子mcofp-3(M.coruscus foot protein-3)主要分布于贻贝足丝盘,胎贝在水环境下的黏附过程中起到关键作用,但因其难溶于水且在贻贝足丝盘中含量极低,故妨碍了对其进行深入研究.为建立厚壳贻贝足丝蛋白mcofp-3的真核表达体系,并获得足够的mcofp-3黏附蛋白进行后续研究,采用酵母表达体系对mcofp-3进行了重组表达.通过PCR方法克隆厚壳贻贝的moofp-3基因,构建mcofp-3的酵母真核表达载体pVT102U/α/mcofp-3,鉴定结果表明,重组表达质粒pVT102U/α/mcofp-3由真核载体pVT102U/α和mcofp-3的成熟肽DNA片段组成,插入的mcofp-3成熟肤DNA片段与预期序列完全一致;采用LiAC转化法将重组表达质粒转化到S78酿酒酵母中,经过RT-PCR分析以及1.0%的琼脂糖凝胶电泳检测,结果表明,重组的mcofp-3得到了成功的转录;发酵菌液经阳离子交换柱及高效液相色谱分离,以及TrisTricine-SDS-PAGE检测,结果表明,重组的厚壳贻贝黏附蛋白分子mcofp-3得到了成功表达,表达产物分子量约为6 kD,与预期分子量一致.
药用植物毛冬青Ilex pubescens Hook.et Arn.含有大量的五环三萜及三萜皂苷,化学结构复杂多样.三萜类化合物骨架的修饰与其生物合成途径下游的一类关键酶——细胞色素P450单加氧酶(CYP450)密切相关.本研究通过分析毛冬青转录组数据,筛选到1个可能具有五环三萜C-28位氧化功能的CYP450基因(IpAO2).克隆IpAO2基因并将其通过质粒转化法导入能高效合成amyrin的酿酒酵母工程菌中,GC-MS分析重组酵母代谢产物,发现IpAO2基因编码的蛋白可以将α-amyrin和β-amyrin分别氧化为熊果酸和齐墩果酸,确定IpAO2是一个五环三萜C-28位氧化酶基因.IpAO2基因的鉴定对全面阐明毛冬青三萜及三萜皂苷的生物合成机制具有重要意义,为后期开展毛冬青活性三萜类化合物的代谢工程研究奠定了基础.
以酿酒葡萄品种梅鹿辄为材料,研究了戈壁条件下葡萄的越冬防寒保护技术.结果表明,覆彩条布+湿土的防寒效果最好,越冬存活率可达95.94%,而且费用相对低廉,是适宜嘉峪关及酒泉戈壁地区葡萄越冬防寒保护的经济有效措施.

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