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桑椹果酒专用酵母的筛选及鉴定

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2024-08-08 阅读:206
对来自成熟桑椹果实、桑叶以及桑果园土壤的酵母进行桑椹果酒专用酵母的筛选.以TTC显色法、产气初筛、大瓶复筛以及放大试验优选菌株,最终得到一株优良酵母菌株.发酵试验结果表明该酵母菌起酵快,发酵7d即可产酒11.7%(体积分数),能取代对照菌种进行桑椹果酒的发酵.通过形态观察、API生理生化试验、18S rDNA序列测定及系统发育分析对该菌进行了鉴定,结果表明:筛选到的酵母菌株呈椭球状,在产孢平板上有子囊孢子产生,在玉米粉琼脂培养基上无假菌丝产生.生理生化及分子鉴定结果表明:该菌与酿酒酵母属的Saccharomyces sp.WW-W23最为接近,相似性达到97%,故命名为桑果酵母(Saccharomyces cerevisiae Sang-guo).
从推迟采收的赤霞珠葡萄果实中分离出野生葡萄酒酵母,进行初筛,再经紫外线诱变、复筛,测定其各项指标.筛选出5株野生葡萄酒酵母菌株,并与对照葡萄酒酵母进行比较.初步得出结论为:IW3、IW5耐糖度达到380 g/L,耐酒精度达16%,耐SO2达120 mg/L,酒精产率达10%以上,发酵结束后陈酿速度快,酿造的甜型葡萄酒品质优良.
药酒是我国中医发展史上浓墨重彩的一笔,是将药物用白酒或黄酒以一定的方法处理后,使药物有效成分溶于酒中,滤去药滓而成.以其易于发散,容易吸收,制作简易,携带方便,药性持久等特点被世人所传承.现对酒剂的历史、制作方法、服法及临床功用四个方面进行总结和阐述.
利用固态发酵技术直接将糖质原料转化为乙醇,过程简单且糖利用率高,已经成为近年来的一个研发热点.为寻求最适原料及菌种,该文对不同原料和菌株进行固态发酵产乙醇特性进行了比较研究:2种菌株为实验室自行筛选酵母菌株TSH和市场上常见的安琪酿酒酵母菌株AGL;3种糖料作物为甘蔗、甜菜和甜高梁.结果表明,无论对于TSH或者AGL,投入相同质量的原料,由于可发酵总糖初始含量的不同,最终乙醇产量最高为甜菜,甜高梁次之,甘蔗最低.为消除原料初始糖含量不同造成的影响,该文比较了消耗单位质量糖分所生成的乙醇质量,发现对于2种菌株甜高粱都具有最高的乙醇/糖转化率,说明甜高粱茎秆中糖分用于生成乙醇的比率较多,而用于维持酵母菌自身生长繁殖及副产物生成的糖分较少.比较2菌株的发酵能力,对于甜高梁TSH表现出较为明显的发酵优势:发酵周期比AGL缩短了近6h,且乙醇/糖转化率略高于AGL;而对于甘蔗和甜菜原料,TSH的乙醇产率与AGL相差不大;说明自行筛选的TSH菌种对多种糖料发酵底物具有广泛适用性,具有良好的工业应用前景.该文对利用糖质原料固态发酵生产燃料乙醇工艺的工业化实现及改进具有一定的借鉴意义.
利用PCR方法以酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae S288c基因组DNA为模板,PCR扩增γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(GSH1)及谷胱甘肽合成酶(GSH2)基因,以乙醇脱氢酶(ADH1)启动子进行表达,并以Kan'基因和Hyg'基因作为筛选标记,构建了两个重组表达质粒YEplace181AK-GSH1和YEplace181AH-GSH2.采用电击法将这两个质粒分别和同时转入工业酿酒酵母菌株Saccharomyces cerevisiae TS013,在含有G418或(和)Hygromycin的平板上筛选阳性克隆S.TS013/GSH1、S.TS013/GSH2和S.TS013/GSH1+GSH2.重组菌进行摇瓶发酵,采用四氧嘧啶法测定培养细胞合成谷胱甘肽含量.结果显示,不同转化子重组菌的胞内谷胱甘肽产量比宿主菌分别提高了44.11%、29.79%和56.47%.
建立了一种新型的冷冻熔炼液-液萃取法直接提取啤酒中的 N-二甲基亚硝胺( N-nitrosodimethylamine, NDMA),萃取液经 GC-FID 分析,双柱法定性,外标法定量。优化的前处理条件为:以二氯甲烷为萃取溶剂,啤酒样品和萃取溶剂的体积比为9:1,-19℃下冷冻16 h。结果表明:NDMA 在5~200 mg / L 范围内具有良好的线性关系(r2=0.9996);在5、10和20 mg / L 3个加标水平下的回收率分别为84.94%、83.24%、85.14%,平行7次测定的相对标准偏差(RSD)分别为3.06%、3.19%、2.63%。与常规液-液萃取方法(需要经过蒸馏、萃取、旋蒸、氮吹4个步骤)相比,本方法稳定、可靠,且操作简单,有机溶剂消耗量少。

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