针对传统发酵豆粕的品质与豆粕的利用率低等缺陷,用枯草芽孢杆菌、酿酒酵母菌、乳酸菌(保加利亚乳杆菌与嗜热链球菌以1∶1比例混合)为发酵菌株,进行单因素发酵豆粕的试验.以发酵温度、料水比、接种量及发酵时间为单因素,经优化试验得到,枯草芽孢杆菌发酵豆粕的最佳条件:发酵温度为37 ℃,料水比(m/V)为1∶1,接种量为5%,发酵时间为48 h,此时发酵豆粕粗蛋白质量分数增幅最大为62.3%,呈偏碱性的酱香味;酿酒酵母菌优化后的发酵工艺条件:发酵温度为31 ℃,料水比(m/V)为1∶1,接种量为5%,发酵时间为60 h,此时发酵豆粕粗蛋白质量分数为53.8%,具有浓郁的酵母香;乳酸菌发酵豆粕的最佳条件:发酵温度为37 ℃,料水比(m/V)为1∶1.2,接种量为7%,发酵时间为72 h,此时发酵豆粕粗蛋白质量分数为48.6%,有酸香味.
目的 观察早期冰敷降温在重型颅脑损伤治疗中的作用.方法 对2002-06～2005-12 69例重型颅脑损伤病人随机分为观察组和对照组,观察组早期应用冰敷控制体温,观察早期冰敷降温对重型颅脑损伤病人体温、昏迷时间、病死率的影响.结果 2组在体温、平均昏迷时间、病死率三个方面有明显差异.结论 早期冰敷降温治疗重型颅脑损伤疗效确切,值得基层医院推广应用.
巨核酸酶I-SceI是由酿酒酵母线粒体中核糖体大亚基上的Ⅰ型内含子编码的一种核酸内切酶,近年已被应用于转基因研究中.I-SceI介导的转基因大多是将I-SceI蛋白和带有其识别位点的质粒共注射于动物的受精卵,但注射酶蛋白前期处理耗时长且工作量大,直接用I-SceI的mRNA代替蛋白进行注射更为简捷.本研究应用I-SceI mRNA介导荧光蛋白基因在斑马鱼中的转植,进一步了解其转基因效率.首先设计合成带有巨核酸酶I-SceI编码序列的辅助质粒(pCS2-I-SceI),并分别构建了带有巨核酸酶I-SceI识别位点、EF1α启动子和荧光蛋白基因(eGFP/RFP)编码序列的供体质粒pI-SceI-EF1α-eGFP/RFP.辅助质粒pCS2-I-SceI体外转录成mRNA,以50 ng/μL供体质粒和100 ng/μL的I-SceI巨核酸酶mRNA共注射到斑马鱼(Danio rerio)受精卵中,注射后48 h的斑马鱼eGFP的平均荧光表达率可达75.86％.在斑马鱼的头部、躯干到尾部均可观察到荧光蛋白的表达,且随着胚胎发育,荧光信号逐渐增强.结果表明I-SceI系统在斑马鱼中可介导较高效率的转植,具有在经济鱼类转基因研究中应用的潜力.
甾醇是真菌病原体白色念珠菌细胞膜的基本成分,这些细胞膜使白色念珠菌对多种外界压力具有敏感性,如离子压、渗透压、氧化压力、以及抗真菌药物.临床上常用抗真菌唑类来抑制麦角甾醇的生物合成.近年来,酿酒酵母中麦角甾醇的合成、贮存和代谢已被深入研究;然而,这些过程在白色念珠菌上并没有得到很好的研究.本文描述了麦角甾醇在细胞生物学动态过程中的重要作用,以及它在包括脂筏、脂滴、液泡和线粒体的生物膜系统中的重要地位.随着研究的深入,将为白色念珠菌耐药性和形态学转换方面产生新的看法.
我国啤酒大麦种植区域分布不科学,缺乏扶植导向政策,组织生产管理体制不合理,品种酿造特性欠佳.需积极扶持国产啤酒大麦的生产经营,建立衔接良好的产业链,积极推进国产啤酒大麦走产业化道路.
香叶基香叶醇(geranylgeraniol,GGOH)是生产香料、药物、维生素A和E的重要中间体,其生物活性构型为(E,E,E)-GGOH.为了提高酿酒酵母的(E,E,E)-GGOH产量,在表达了香叶基香叶基焦磷酸合酶-法尼基焦磷酸合酶融合酶(BTS1-DPPl)和香叶基香叶基焦磷酸合酶-二酰基甘油二磷酸磷酸酶融合酶(BTS1-ERG20)的初始菌株(产34.85mg·L-1GGOH)的基础上,本实验进一步利用代谢工程的手段对法尼基焦磷酸(FPP)代谢节点处进行代谢流重排.一方面,过表达了来源于红法夫酵母的香叶基香叶基焦磷酸(GGPP)合酶突变体(CrtE03M),增加了前体物质GGPP的供应,从而将GGOH产量提高了1.6倍,达到56.04mg·L-1;另一方面,利用葡萄糖诱导性弱启动子PHXT1对竞争支路关键酶角鲨烯合酶(ERG9)进行下调,从而使GGOH产量提高4.5倍,达到156mg·L-1.同时,通过敲除GAL80基因构建了葡萄糖调控的GAL体系,用以控制GGOH的合成,与PHXT1控制的角鲨烯合成支路一起,构成了顺序表达体系,最终,以十二烷为有机相,在摇瓶中进行两相发酵,培养72 h后获得GGOH产量183.07mg·L-1,与初始菌株相比提高了5倍.本工作对其他FPP下游途径的代谢调控具有借鉴意义.
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