酿酒酵母中Tca17经Rab蛋白Ypt31参与囊泡运输和细胞自噬的研究

为了探讨蛋白质转运颗粒(TRAPP)复合体相关蛋白Tca17通过何种Rab蛋白参与囊泡运输和细胞自噬过程,用绿色荧光蛋白(GFP)标记野生型和TCA 17敲除突变体中囊泡运输标志蛋白Snc1后,检测菌株生长和GFP-Snc1运输缺陷情况,并检测不同Rab蛋白对突变体的生长和GFP-Snc1运输缺陷的抑制情况.相应地,用GFP标记野生型和TCA17敲除突变体中细胞自噬标志蛋白Atg8后,检测菌株生长和在营养缺乏条件下GFP-Atg8的运输和降解缺陷情况,并检测不同Rab蛋白对突变体的生长和GFP-Atg8的运输及降解缺陷的抑制情况.结果表明:敲除TCA 17导致菌株高温敏感,Snc1运输受阻以及Atg8运输和降解异常,过量表达Rab蛋白Ypt31能够抑制TCA17敲除突变体的囊泡运输和细胞自噬缺陷表型,而Rab蛋白Ypt1不具有类似功能,这说明Tca17通过Rab蛋白Ypt31参与囊泡运输和细胞自噬过程.
PRTV涂料具有良好的防污闪性能.但用于防覆冰闪络方面,国内外的相关研究还鲜有报道.根据人工气候室的试验结果,笔者分析了在覆冰期、融冰期覆冰水电导率和串长对涂有PRTV绝缘子串的覆冰闪络电压的影响.通过对涂有和未涂PRTV两种形式绝缘子串的覆冰闪络特性的分析.得出PRTV对于提高覆冰绝缘子闪络电压没有效果.涂PRTV的绝缘子串其冰闪电压约降低10%～15%;PRTV、,涂层的憎水性引起绝缘子表面覆冰状态发生变化,使得冰层与涂料表面粘附不紧密,内部存在许多微小气隙,容易产生局部放电和局部电弧,从而损坏PRTV涂层,导致绝缘子串泄漏电流增大.
本试验旨在研究不同水平啤酒糟(BSG)对奶牛日粮主要养分采食量、产奶性能、血液生化指标的影响.选取50头体重、胎次、泌乳天数及日均产奶量相近、健康的泌乳高峰期高产荷斯坦奶牛,随机分为5组,每组10共,以干物质为基础,分别饲喂不同BSG水平的日粮,各组BSG水平分别为对照组为0,饲喂基础日粮;试验Ⅰ组为9.1％;试验Ⅱ组为11.1％;试验Ⅲ组为13.0％;试验Ⅳ组为14.9％.预试期14d,正试期60d,检测日粮主要养分采食量、日均产奶量、乳成分、血液生化指标.结果表明:与对照组相比,各组日粮DM采食量差异不显著(P＞0.05);与试验Ⅲ组、试验Ⅳ组相比,试验Ⅱ组DM采食量显著提高(P＜0.05);试验Ⅱ组、试验Ⅲ组、试验Ⅳ组日粮粗蛋白(CP)采食量显著提高(P＜0.05);BSG水平对日粮中性洗涤纤维(NDF)采食量影响显著(P＜0.05),对日粮酸性洗涤纤维(ADF)、钙(Ca)、磷(P)采食量无显著影响(P＞0.05);试验Ⅱ组、试验Ⅲ纽、试验Ⅳ组的日均产奶量、乳脂率、乳蛋白率均显著高于对照组(P＜0.05),其中试验Ⅱ组比对照组日均产奶量增加6.04 kg (P＜0.05);对奶牛血清葡萄糖、总蛋白含量影响显著(P＜0.05),对血清白蛋白、尿素氮、甘油三酯、胆固醇、肌酐酸血清氧化碳结合力、TCO2含量均无显著影响(P＞0.05).综合考虑本试验条件下奶牛日粮营养物质采食量、产奶性能和血液生化指标,奶牛日粮BSG的适宜添加水平为11％(以干物质为基础).
调查研究了宁夏贺兰山东麓御马酿酒葡萄基地不同种植年限的土壤微量元素铁、锰、铜、锌含量及分布.结果表明,洪积母质发育的地带性土壤全量微量元素含量比较低,只相当于全国平均水平的50～67%.各土层土壤有效铜含量都在临界值以上;有效铁在剖面中各层含量远低于全国平均值,也低于果树有效铁丰缺的临界值;除表土外,在剖面中其它层次有效锌含量低于临界值;土壤有效锰含量基本在临界值以下.土壤有效性微量元素含量低的主要原因是来自石灰岩的洪积母质,高pH值、高碳酸钙含量及低有机质含量.
目的构建S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因工程菌,为酶促转化法生产S-腺苷甲硫氨酸奠定基础.方法应用PCR技术从S-腺苷甲硫氨酸高产酿酒酵母染色体DNA中扩增得到S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因sam2,将其克隆至表达载体pT7-7,转化大肠杆菌,1%琼脂糖电泳比较大小,筛选重组子.结果 SDS-PAGE显示重组菌S-腺苷甲硫氨酸合成酶亚基分子量约为42KDa,平均表达量约占菌体总可溶性蛋白的42%,酶活达到14.1 U/g湿菌体,比宿主菌酶活提高15.7倍.结论酿酒酵母SAM合成酶基因在大肠杆菌中高效表达,重组菌已具有初步的工业化应用价值.
本论文以枯草芽孢杆菌为例,研究白酒发酵副产物黄水的抑菌机制.通过描绘细菌生长曲线,扫描电镜观察菌体表面形态,电导率实验研究实验菌细胞膜通透性,SDS-PAGE凝胶电泳观察菌内蛋白变化,DAPI荧光染色观察细菌核酸含量变化进行研究.结果证明:酿酒黄水处理的枯草芽孢杆菌生长曲线未出现明显对数生长,扫描电镜观察菌体表面粗糙,电导率实验证明酿酒黄水不能改变细胞膜通透性,SDS-PAGE凝胶电泳分析表明酿酒黄水可抑制菌内蛋白质合成,DAPI荧光染色结果表明酿酒黄水作用9h后,枯草芽孢杆菌总DNA量减少30.39％,作用3h后,RNA总量减少39.64％.因此,酿酒黄水抑菌机制主要通过抑制枯草芽孢杆菌菌体内蛋白质和核酸的合成实现的.