酿酒酵母细胞破碎释放乙醛脱氢酶的研究

乙醛脱氢酶(ALDH)是一种胞内酶,在从酵母中分离提取ALDH的过程中,破碎细胞是其中的关键步骤之一.本文着重考察了搅拌粗提、珠磨破碎、高压细胞破碎仪和高压破碎仪的细胞破碎方法对释放ALDH的影响.结果表明,用高压破碎仪破碎,酵母细胞破碎率可达到95%以上,而且有效地防止了ALDH的分解及降解,是一种较为理想的破碎方法.
采用高效复合培养基M3D将高降糖速度、低双乙酰、低乙醛3项啤酒酵母发酵特性的选育方法进行同步综合,结合紫外诱变法可筛选出同时具备3种发酵特性的啤酒酵母菌株,从而对出发菌株的发酵性能进行综合提升.对应用该法筛选得到的实验菌株进行低温发酵,得到6株(M3D03、M3D05、M3D08、M3D11、M3D19、M3D22)相对出发菌株KB综合发酵性能显著提升的优良菌株,综合正突变率达到24.00％.菌株M3 D03的100L中试试验结果与实验室规模低温发酵各发酵指标变化率相差不大,且所酿啤酒风味良好.
【目的】确定玉米大斑病菌（Setosphaeria turcica）MAPK基因StIME2在基因组中的位置；系统解析目的蛋白质StIme2的结构特征；分析玉米大斑病菌StIME2在不同发育时期及不同胁迫条件下（温度、氧胁迫、高渗胁迫）的表达，为深入研究该基因的功能奠定基础。【方法】通过本地Blast搜索玉米大斑病菌基因组数据库，确定StIME2在基因组的精确位置；利用ProtParam在线分析StIme2蛋白的理化性质，利用SOMPA在线软件预测StIme2蛋白的二级结构。通过PHYRE2在线服务器对StIme2蛋白的三维结构进行预测。利用半定量RT-PCR方法分析不同发育时期及不同胁迫条件下StIME2的表达。【结果】玉米大斑病菌StIME2为一类与酿酒酵母中ScIME2具有较高同源性的基因，为在植物病原真菌中鲜有报道的MAPK基因。该基因的ID为98105，位于scaffold_7正链的1560184—1562574位置，StIme2蛋白具有MAPK类蛋白激酶的特征性保守结构域，其二级结构主要以α-螺旋和无规则卷曲为主，β-折叠较少且主要存在于N端，其三级结构具有1个较小的N端域和1个较大的C端域；该基因在病菌分生孢子时期表达量最高，附着胞发育时期表达量最低。将病菌置于不同温度条件下处理，发现培养温度为28℃时StIME2表达量达到最高。在高渗胁迫条件下，随NaCl浓度的增加，StIME2的表达量逐渐增加，但在较高胁迫条件下（0.8 mol·L-1 NaCl），该基因表达几乎被完全抑制。经H2O2胁迫处理后，StIME2的表达量随H2O2的浓度增加而增强，在10 mmol·L-1 H2O2的处理下表达量最高。【结论】玉米大斑病菌StIME2位于scaffold_7正链的1560184—1562574位置。StIme2蛋白具有MAPK激酶的所有特征性保守结构域，为一类功能鲜有报道的MAPK蛋白激酶。该基因在玉米大斑病菌分生孢子时期表达量最高，推测可能在调控病菌分生孢子发育过程中起重要作用。该基因的表达水平可随培养温度的变化而变化，28℃表达量最高。该基因可能参与病菌的高渗胁迫及氧胁迫反应。
代谢综合征是机体以胰岛素抵抗为核心，发生碳水化合物、脂肪、蛋白质等物质代谢紊乱，进而导致肥胖、血脂异常、心血管疾病等症候群的病理状态，现已成为威胁人类健康的重要因素。蜂蜜富含糖类、酚类等营养成分，具有抗氧化、抗炎、抑菌等多种生物活性，大量研究表明蜂蜜可以缓解代谢综合征，并对肠道菌群有调节作用。本文从胰岛素抵抗、调节糖脂蛋白代谢途径的机制和调节肠道菌群等方面阐述蜂蜜及其活性成分对代谢综合征的缓解作用，综述蜂蜜对代谢综合征作用机理的相关研究进展，旨在为代谢综合征的综合防治和功能性蜂蜜产品的开发提供理论依据。
采用vali结冻法和含菌平板培养法,从9种供试药剂中筛选出1号、2号、3号、5号、7号5种对INA细菌触杀及破坏冰蛋白作用的药剂.将5种筛选的药剂于日光温室和田间进行药剂防霜试验研究,结果表明,日光温室霜冻温度为-4℃时,5种药剂中3号、7号防霜效果显著,分别为47.05%～67.74%和49.44%～69.33%.3号、7号分别提高座果率12.25%～14.83%和4.69%～11.36%,与对照相比差异达显著水平.大田温度为-6.5℃时,5种药剂中3号的防霜效果为21.80%,提高座果率9.17%,与对照相比达显著水平.
以酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)乳酸抗性突变株T-27-24(αtrp-ura-)和其出发菌株T-27(αtrp-ura-)为研究对象,考察了其乳酸抗性产生的原因并对其突变体进行了遗传分析.结果表明:该突变株对乳酸的抗性不是由于对环境条件的适应而产生的,而是由基因突变产生的;考察线粒体消除T-27-24(αtrp-ura-)菌株与乳酸抗性敏感菌株S13-18(alys-)杂合二倍体在乳酸抗性平板上的生长情况,证明乳酸抗性突变基因位于核基因上,同时对T-27(αtrp-ura-)和S13-18(alys-)杂合二倍体进行四分体分析,发现乳酸抗性属单基因控制,且为显性基因控制.