Oenococcus oenj苹果酸-乳酸发酵关键酶基因在酿酒酵母中的转化与表达

利用西北农林科技大学葡萄酒学院筛选出的酒酒球菌(Oenococcus oeni)优良菌系SD-2a的包含苹果酸-乳酸酶基因(mleA)和苹果酸通透酶基因(mleP)约2.6 kb的基因片段,并以PGK1强启动子和ADH1终止子为调控元件,以酵母-大肠杆菌穿梭质粒YEp352为载体,构建了重组表达质粒pYELmleAP,转化酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)YS58,筛选获得酵母转化子YS58/pYELmleAP.斑点杂交检测表明目的基因mleA转化到受体菌中,SDS-PAGE检测表明获得的转化子表达了苹果酸-乳酸酶的目的蛋白.对酵母转化子培养上清进行HPLC检测,采用t检验差异显著性分析,结果表明mleA基因在受体菌中进行了功能性表达.获得的酵母转化子在添加L-苹果酸的SD/-Ura培养基中培养4 d,培养液中的L-苹果酸含量降低,培养液上清中L-苹果酸的剩余含量比空载体转化子极显著降低,苹果酸降低19.33%～19.42%.对照未检出乳酸的生成,供试的转化子L-乳酸生成量为1249～1368 mg/L,与对照差异显著.
本发明涉及包括送箱辊道、机架、盒装白酒整列机构、平移升降系统、撑箱机构、抓手、丝杆、伺服电机、2根方形导轨、盒装白酒输送链板；盒装白酒整列机构的装箱平台、丝杆、伺服电机、2根方形导轨分别安装在机架上，且平移升降系统的4个滑块与机架上端的2根方形导轨配合；且丝杆的一端与伺服电机相连，平移升降系统的平移升降架穿在丝杆上并通过一个螺母固定在一起，抓手与平移升降系统的2根光轴下端连接，盒装白酒输送链板、送箱辊道均固定于地面并与盒装白酒整列机构、平移升降系统、抓手、撑箱机构配合完成盒装白酒装箱功能。本发明具有适应白酒盒型范围广、装箱定位准确、搬运负载大、性能稳定等优点。解决困扰白酒行业多年装箱难题。
目的 观察剖宫产术后伤口使用冰垫镇痛的临床效果.方法 选取我院2016年3月至2016年6月收治的155例剖宫产产妇,随机分为观察组(79例)和对照组(76例).观察组术后采用冰垫冷敷镇痛,对照组未进行镇痛.对比两组产妇的术后疼痛程度、 伤口愈合情况及住院满意度.结果 观察组的术后疼痛程度明显低于对照组(P<0.05).两组产妇的伤口愈合情况比较差异无统计学意义(P>0.05).观察组的住院满意度为91.14%,明显高于对照组的63.16%(P<0.05).结论 采用冰垫冷敷对剖宫产术后产妇进行镇痛,效果良好,不影响患者术后伤口愈合,值得临床推广应用.
通过正交设计,对大麦新品系“08PJ-36”设置肥料与密度效应梯度,探索肥料与密度效应对“08PJ-36”产量与品质的影响,确定“08PJ-36”在黄灌区适宜的肥料施用量及播种密度.结果表明:啤酒大麦“08 PJ-36”在内蒙古河套灌区生产潜力可达586.15 kg/667 m2,与此适应的肥料与密度为,纯氮9.0 kg/667 m2,纯磷8.1 kg/667 m2,纯钾1.5 kg/667 m2,密度31万株/667 m2,此条件下,籽粒蛋白质含量及千粒重能够符合GB/T 7416-2008之要求.
通过数值模拟瓶装啤酒隧道式巴氏杀菌的过热阶段(巴氏杀菌加热部分的最后一个阶段),确定瓶中的冷核(slowest heating zone,SHZ),并运用L9(31)正交试验,分析喷淋水温度、喷口处喷淋水湍流强度以及瓶子的运行速度三因素对瓶中啤酒温度分布均匀性的影响.结果表明:冷核起先是位于瓶底,后向上移动,但不超过灌装高度的1/2;在加热至7 min时,喷淋水温度、喷口处喷淋水湍流强度影响显著,瓶子的运行速度则不显著,试验的可能的最优条件:喷淋水温度为65℃,喷口处喷淋水湍流强度为3％,瓶子运行的速度为3 mm/s.
旨在探究酿酒酵母细胞壁对原代培养绵羊瘤胃上皮细胞β-防御素1(Sheep beta-defensin-1,SBD-1)表达的影响.本试验首先提取酿酒酵母细胞壁,并进行鉴定;再用酿酒酵母细胞壁(0、25、50、100、200、400 μg·mL-1)刺激健康绵羊的原代瘤胃上皮细胞(0、2、4、8、12、24 h)后,进行RT qPCR和ELISA试验,确定诱导SBD-1表达的最佳浓度和时间.结果表明:1)本试验提取的酿酒酵母细胞壁成分较纯,可用于后续试验;2)体外培养绵羊瘤胃上皮细胞呈鹅卵石铺路状,符合试验要求;3)使用200μg·mL-1的酿酒酵母细胞壁去刺激瘤胃上皮细胞12h,SBD1mRNA和蛋白表达量最大,与其他组相比均差异极显著(P＜0.001).综上表明,酿酒酵母细胞壁能够促进绵羊瘤胃上皮细胞SBD-1的表达,且酵母细胞壁最佳浓度和刺激时间分别为200 μg·mL-1和12h.