生物合成γ-氨基丁酸酿酒酵母谷氨酸脱羧酶基因的克隆与表达

为了提高酵母菌的y-氨基丁酸产量,本研究以十六烷基三甲基溴化铵法(hexadecyl trimethy ammonium bromide,CTAB)提取的酿酒酵母28基因组DNA为模板,扩增得到序列长度为1 758 bp的GAD1基因,经比对与S.cerevisiae S288c的一致性达到98.58％,并设计引物扩增包括GAD1基因上游启动子及调控序列,下游终止子在内的全长基因序列,长度为3 490 bp.将全长基因序列克隆至高拷贝质粒pUG6,构建重组质粒p28.以菌株28作为出发菌株进行转化,经G418抗性筛选得到转化子,进一步经过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)实验验证,质粒提取及酶切验证,确证得到重组子DL28.经重组质粒p28的特性研究得知,重组质粒p28具有良好的遗传稳定性,无抗性传代培养10次重组质粒不丢失.转化后进行酶活力测定,重组子DL28的谷氨酸脱羧酶(glutamic acid decarboxylase,GAD)酶活力比菌株28提高73.8％.通过以上实验结果得出结论,GAD基因高表达菌株DL28具有更高的G418抗性和GAD酶活性.
本文介绍了以啤酒厂废水生产动物饲料单细胞蛋白的生产过程,分析了单细胞蛋白在白虾及断奶仔猪饲喂中的具体应用,以期为促进废弃物资源化利用提供参考.
从中高温大曲中分离出酵母菌,通过制作米曲酿造小曲酒初步探究了大曲中的酵母菌在小曲酒中的发酵能力.采用稀释平板涂布法从大曲中分离纯化出酵母菌,经形态学和分子生物学鉴定确定了酵母菌的种属,并优化了米曲制作过程中原料的含水量和制曲时间.结果表明,从中高温大曲中共分离出4株酵母菌(Y1、Y2、Y3和Y4),经鉴定Y1为异常威克汉逊酵母(Wickerhamomyces anomalus),Y2为东方假丝酵母(Candida odintso-vae),Y3和Y4为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae).米曲的最佳制作工艺为在原料含水量为46％(质量分数)下培养7 d.以高粱为原料,米曲和糖化酶为糖化发酵剂发酵产酒发现,4种酵母的产酒能力依次为酿酒酵母Y3>酿酒酵母Y4>异常威克汉逊酵母Y1>东方假丝酵母Y2.该研究为提高小曲酒质量和开发大曲中微生物资源提供了一条有效途径.
利用多因素模糊综合评判法对新疆酿酒葡萄的种植进行了气候区划.将新疆划分为4个类型区,即:最适宜区、适宜区、较适宜区和不适宜区.
[目的]探讨制备大豆小分子肽的最佳工艺条件.[方法]以脱脂大豆粉为原料,通过多种微生物菌种固态发酵产蛋白酶水解制备小分子肽,并应用正交试验优化制备条件.[结果]试验得出,微生物发酵法制备大豆小分子肽的最优发酵条件为:料液比1∶1.0 g/ml、0.2％黑曲霉、0.2％米曲霉、1‰酿酒酵母、发酵温度32℃,湿度80％、发酵时间36 h时,蛋白酶活力为466.8 U/g;最优水解条件为:水解温度55℃、水解时间10 h、pH 6.5、料液比为1∶2.5 g/ml时,水解度可达到90.61％.[结论]此工艺方法提高了脱脂大豆粉的食用价值和产品附加值.
近年来上海开山冷冻系统技术有限公司承接了若干新建大型啤酒制冷站氨制冷系统工程的整包项目,技术团队对每个项目都进行了创新设计应用.针对已建成投产项目的制冷系统运行数据,总结出了一套针对啤酒制冷站氨制冷系统的全新应用技术.