利用a凝集素在酿酒酵母表面展示CALB 及工业化培养基发酵条件优化

[目的]探索南极假丝酵母脂肪酶B更加经济、简便的固定化方法.[方法]根据南极假丝酵母脂肪酶B的成熟多肽序列,人工合成calb基因.将其克隆到质粒pYD1中的AGA2基因下游,获得的重组质粒pYD1-CALB,转化S.cerevisiae EBY100菌株,并利用酿酒酵母工业化培养基发酵.[结果]成功构建表面展示CALB的酵母工程菌株;重组菌株连续传代10次表达酶活力基本保持不变,具有良好的遗传学稳定性;经工业化培养基发酵优化后,25 ℃发酵48 h,CALB水解活力可达4.25 U/ml,冻干粉活力可达147.82 U/g 干细胞.[结论]利用酿酒酵母表面展示系统固定化南极假丝酵母脂肪酶B具有可行性,且工业化培养基的使用降低了发酵成本.
[目的]研究饲料中添加复合益生菌粉对刺参生长、体壁成分和消化酶活性的影响.[方法]在基础日粮中分别添加含有0、0.2％、0.4％、0.6％、0.8％的复合益生菌粉(由枯草芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、酿酒酵母菌组成,含有106CFU/g)进行喂养试验,养殖8周.[结果]随着复合益生菌添加量的提高,刺参增重率和特殊生长率有增加趋势.与对照组相比,添加0.8％的复合益生菌能显著提高刺参的增重率和特定生长率(P＜0.05).复合益生菌对刺参成活率和体壁成分均无显著影响(P＞0.05).复合益生菌对刺参肠道的消化酶活性也无显著影响(P＞0.05),但有提高刺参肠道脂肪酶活性的趋势.当益生菌添加量为0.4％时,刺参脂肪酶活性最高.[结论]复合益生菌粉能够促进刺参的生长.当益生菌添加量为0.8％时刺参的生长较好.
以酿酒葡萄品种赤霞珠(Vitis vinifera L.‘Cabernet Sauvignon’)果实为试材,研究了葡萄果实发育过程中土壤干旱对果肉、果皮、种子和果梗中总酚时空积累的影响.结果表明,幼果期(花后30 d)种子中总酚含量最高,而成熟期(花后110 d)则果梗中含量最高,且土壤干旱(土壤相对含水量为田间最大持水量的60％±5％)对总酚的空间积累无明显影响.果实发育过程中,果皮、果肉和种子中总酚含量呈持续下降趋势,但土壤干旱导致幼果期果梗、果皮、果肉和种子中总酚含量分别比CKⅠ(不控制灌溉,土壤相对含水量为田间最大持水量的85％±5％)提高了8.1％、7.1％、8.9％、8.1％,比CKⅡ(采用塑料膜避雨设施,其他同CK Ⅰ)提高了6.3％、8.0％、19.0％、7.0％；成熟期果梗、果皮、果肉和种子中总酚含量分别比CK Ⅰ提高了6.8％、14.4％、46.1％、-10.0％,分别比CKⅡ提高了10.5％、33.8％、86.6％、28.7％.土壤干旱并不改变葡萄果实发育过程中总酚的时空积累规律,但能促进果实各部位总酚的积累.
研究宁夏贺兰山东麓产区霞多丽、贵人香干白葡萄酒地域特性的主要香气特点,运用固相微萃取技术提取霞多丽、贵人香干白葡萄酒的香气组分,用内标法对检测峰予以定量分析,并结合气相色谱-质谱、计算机检索技术对分离香气化合物进行分析测定,共检测出49种香气物质.结果表明,干白葡萄酒香气成分主要有酯、醇、酸、酚、萜烯5类化合物,其中酯类、醇类、酸类分别为18种、16种、4种;两品种酒样(霞多丽与贵人香)干白葡萄酒香气成分含量显著不同,有关香气成分含量多少与其贡献度大小并不成正比,与气味活度值(Odor Activi-ty Value,OAV)大小关系较为密切;贵人香新酒主要香味成分与霞多丽相当,霞多丽酒样具有一定的青苹果、草莓果香,贵人香则有较明显的花香、水果的味道,经过陈酿的贵人香酒样表现出香蕉、椰子等热带水果及奶酪等乳制品的味道;经气相色谱-质谱联用仪(Gas Chromatograph-Mass Spectrometer,GC-MS)检测,在定量出酒样中的49种香气成分中,高含量化合物中酯类香气贡献率明显高于醇类和酸类,微量成分中酚类和萜烯类贡献率高,微量香气成分中,虽然一些物质含量较低,但具有较高贡献率;经聚类分析得出,新酒香气成分含量表现出年份影响较品种差异明显,但经过陈酿酒样,则品种差异占主要优势.
在分析江西省境内覆冰观测站分布合理性和资料可靠性的基础上,探讨了历史最大标准覆冰厚度与海拔高度以及纬度之间的关系.由非线性回归分析可知在特定区域内,冰厚随海拔高度以及纬度的增加呈指数型增加趋势,但在400m以下的低海拔非封闭地区,冰厚反而随海拔高度增加呈减小的趋势.通过上述结果以及地理环境综合分析,将区域内的覆冰类型分为海拔影响型和纬度影响型,并对区域进行了划分,提出了不同影响类型下的覆冰厚度的估算公式,为江西省设计冰厚取值及冰区划分研究奠定了基础.
目的：通过克林霉素诱导抗生素相关性腹泻（antibiotic-associated diarrhea，AAD）模型，探究动物双歧杆菌乳亚种XLTG11缓解小鼠AAD的作用。方法：将48 只6 周龄C57BL/6N雄鼠随机分为4 组：对照组、模型组、低剂量组和高剂量组，除对照组外，各组小鼠连续14 d灌胃克林霉素（250 mg/（kg mb·d））诱导AAD模型，然后低剂量组和高剂量组灌胃不同剂量（0.2 mL，5×106、1×107 CFU）动物双歧杆菌乳亚种XLTG11，测定小鼠体质量增长量、盲肠质量、粪便含水量和粪便稠度，测定结肠肿瘤坏死因子α、白细胞介素6（interleukin 6，IL-6）、IL-1β、IL-10水平，血清脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）和D-乳酸质量浓度，测定肠道菌群组成及短链脂肪酸含量，以及肠道屏障和核因子κB（nuclear factor kappa-B，NF-κB）信号通路相关基因表达水平。结果：高剂量动物双歧杆菌乳亚种XLTG11显著提高AAD模型小鼠的体质量增长量和抗炎细胞因子水平（P＜0.05），显著降低盲肠质量、粪便含水量、粪便稠度评分、促炎细胞因子水平、血清LPS和D-乳酸质量浓度（P＜0.05），显著上调闭锁小带蛋白1、Occludin、Claudin-1和黏蛋白2基因的表达水平，调节肠道菌群组成，粪便中乙酸、丙酸和丁酸含量显著增加，显著下调Toll样受体4（Toll like receptor 4，TLR4）、髓分化因子88（myeloid differentiation factor 88，MyD88）和NF-κB信号通路相关基因的表达水平。结论：动物双歧杆菌乳亚种XLTG11能够改善AAD模型小鼠腹泻相关指标，调节细胞因子和肠道菌群组成，提高短链脂肪酸含量，提高肠道屏障相关基因的表达和抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的激活，进而有效缓解克林霉素诱导的AAD。