酿酒酵母APA1的定点突变以及与增强型绿色荧光蛋白EGFP基因的共表达

应用基因突变技术向酿酒酵母APA1基因中引入同义突变,为进一步研究APA1表达量与酿酒酵母硫化氢产量的关系提供实验基础.从酿酒酵母S288c中利用聚合酶链式反应扩增APA1基因,与EGFP基因融合构建表达载体.以该载体为模板,通过一步法点突变技术向APA1基因中分别引入APA1-1/2/3/4 4个突变.测序结果表明突变位点与预期结果一致.成功获得了APA1的4个同义突变.一步法点突变技术是一种高效的定点突变方法.分别转化酿酒酵母YS59,荧光显微镜下可见绿色激发荧光,表明APA1-1/2/3/4与EGFP基因共表达.
利用响应分析法考察了微波处理时间、提取时间和水料比3个因素对微波提取酿酒酵母胞内谷胱甘肽提取率的影响.研究发现,谷胱甘肽的最佳提取条件为:微波处理20.96 s、提取时间为13.25 min,加水量与干细胞的比为22.20 mL/g,谷胱甘肽的提取率为13.06 mg/g,比单因素试验最高的提取率高8.3%.且与预期值相符.
本专利申请属于其他酒精饮料制备领域，一种白酒提纯装置，包括密封桶，还包括进气管、转盘、冷凝管和提纯箱，密封桶顶部设有进气口和加酒口，进气口处设有固定杆，密封桶外连接有二氧化碳发生器，转盘和固定杆之间为动密封连接，固定杆与转盘连通处设有涡轮和推力轴承，冷凝管一端依次穿过进气管侧面、涡轮中心并连通在转盘底面中心处，冷凝管与转盘之间为动密封连接，冷凝管另一端为Y形段，其中Y形段的一段朝上开口，Y形段的另一段朝下开口并与提纯箱连通；密封桶外壁缠绕有线圈。本发明通过二氧化碳输送酒精蒸气、冷凝的方式进行提纯，相较于现有技术的提纯方式提纯品质更高，出酒率高。
一种冰白酒的制备工艺，对降度后的食用酒精添加KMnO<SUB>4</SUB>、NaOH溶液进行纯化处理、蒸馏，得高纯度食用酒精；将基础酒、骨架酒、调味酒、陈酒及酒尾，按配比勾兑放样，经降度冷冻过滤，添加高纯度食用酒精，再将酒度调整到产品要求的范围，贮存后经检验合格，即可灌装出厂。上述工艺中高纯度食用酒精可由GB10343－89优级品食用酒精替代。本发明部分去除白酒中的呈味物质，改变了传统白酒浓重口味风格，更加适合目前消费者的口味需要，并且使其能和各种酒类、果汁调兑饮用，丰富了酒品种类，大大降低了白酒中有害成分含量(其中甲醇含量由0.04g/100ml降低到0.008g/100ml以下)，提高了白酒的饮用安全。
以福建闽南地区特产茶叶为主要原料，辅以番石榴汁，研究发酵型茶酒的最佳生产工艺。通过对影响茶酒发酵的各个单因素进行研究，并对发酵条件进行正交优化，经实验验证，得出茶酒的最佳发酵工艺参数为：使用正山小种红茶发酵，酿酒菌种为葡萄酒·果酒专用酵母 RW，茶和水的质量体积比为1∶110，茶汤与番石榴汁比例为2∶1，初始可溶性固形物含量为20°Bx，接种量体积分数为7%。所得产品为浅棕红色，透明发亮，口感醇厚，兼有茶香、醇香和番石榴果香的独特风格。
为了提高产酶能力,采用常压室温等离子体(ARTP)与紫外(UV)复合诱变技术对酿酒酵母G13、G21菌株进行递推式复合诱变,经过一轮ARTP诱变两轮UV诱变,摇瓶培养筛选到两株高产β-葡萄糖苷酶的菌株Dea-G13D1Z2、Dma-G21D1Z2,经连续5代发酵生产试验,产酶水平可分别稳定在240.93和173.38 U/mL,是出发菌株G13、G21酶活的4.61倍和3.59倍.递推式ARTP-UV是一种有效的微生物突变育种的方法,可有效应用于微生物育种工作.