产瓦伦西亚烯酿酒酵母的表达载体适配及发酵碳氮源优化

瓦伦西亚烯是一种倍半萜类化合物,广泛应用于香水、香皂、食品和饮料等工业制造上.但由于其自然含量极低,且目前获取瓦伦西亚烯的方法较为麻烦且花费高,因而构建细胞工厂进行瓦伦西亚烯的生物合成是更为高效和环保的方法.选取酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)作为宿主构建细胞工厂,先在酿酒酵母基因组上引入黄扁柏的瓦伦西亚烯合成酶(Valencene synthase from Callitropsis nootkatensis,CnVS),实现瓦伦西亚烯的初步合成,初始产量为4.16 mg/L.随后利用CRISPR/Cas9系统对酿酒酵母中Mevalonate(MVA)途径的erg9和rox1基因进行敲除,提高通往瓦伦西亚烯合成的碳流量.不同碳氮源浓度发酵的结果表明,细胞生长积累过高可能不利于瓦伦西亚烯的积累.最后探究了不同CnVS表达载体对瓦伦西亚烯产量的影响,并获得17.54 mg/L的最高产量,是出发菌株的4.2倍.
目的探讨饮用草头皇酒是否具有延缓衰老作用.方法以Wistar大鼠及果蝇进行延缓衰老作用的实验研究.结果该酒明显降低老龄大鼠血清和脑组织脂质过氧化(LPO)含量(P＜0.01)及肝组织中的脂褐素含量(P＜0.01),并能明显提高老龄大鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)活力(P＜0.01),可明显延长果蝇寿命(P＜O.01).结论草头皇酒在一定的剂量范围内饮用,对机体延缓衰老过程具有一定的作用.
本研究以纯合二倍体工业酿酒酵母SC iso Kan作为出发菌株进行连续发酵,通过逐步降低发酵体系pH值,对酵母的耐酸性进行长期驯化.从pH2.7发酵体系分离获得耐酸性突变菌株SCiK12,通过孢子形成、分离和培养,获得两株优秀的耐酸性单倍体菌株SCiK12B3 (MATa)和SCiK12 C(MATα),通过交配获得耐酸性二倍体菌株SCiK12 BC4.在35℃,pH2.5条件下,利用15％YPD发酵48 h,和原始出发菌株SC iso Kan相比,菌株SCiK12BC4 (MATa/α)和单倍体菌株SCiK12 B3 (MATa)及SCiK12 C3 (MATα)基于糖消耗的乙醇收率分别提高了12.5％,17.5％和17.2％.本研究结果表明,连续发酵驯化结合单倍体分离和交配是获得耐无机酸突变菌株的有效手段.
为明确酿酒酵母菌株之间硫化氢(H2S)产生量的差异性对黑比诺干红葡萄酒品质的影响,以低产、中产、高产H2S的3株酿酒酵母菌株为供试菌株,分别发酵生产黑比诺干红葡萄酒,对所得酒样的H2S含量,谷胱甘肽含量测定,采用顶空固相微萃取和气相色谱-质谱联用技术进行香气成分定性定量分析,利用主成分分析和感官评价方法对对酒样的感官品质进行分析.结果显示,菌株D01、Z01、Vintage Red的基酒中H2S产生量差异显著且GSH生成量与H2S生成量呈反比关系;D01菌株在香气方面的贡献高于Z01、Vintage Red菌株,D01菌株的基酒感官评价较其他两种整体评分高,且D01菌株可改善葡萄酒口感,增加酒体香气复杂性,稳定葡萄酒颜色,提高葡萄酒品质.
目的:研究髋关节置换术后运用冰敷结合CPM机的康复效果.方法:将60例髋关节置换术后患者随机分为2组,A组术后进行患肢皮牵引,B组运用冰敷结合CPM进行关节功能康复训练,记录静止和活动视觉模拟评分(VAS评分)、术后出血量(引流量).结果:2组术后12h、24h静止VAS评分,48h、72h运动VAS评分,术后48h出血量(引流量)均有显著差异(P＜0.01).结论:髋关节置换术后冰敷结合CPM可以在术后早期控制疼痛,减少出血,改善髋关节功能,促进髋关节功能早日康复.
以酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)为底盘生物,将来源于嗜热菌Thermobifida fusca B6中的己二酸逆降解途径基因搭配不同的酿酒酵母组成型启动子和终止子,构建在3个穿梭质粒上,并导入宿主细胞,成功实现了己二酸的异源合成.将AA-1菌株在YPD培养基中发酵,得到3.39 mg/L己二酸,是同一宿主中已报道的最高值.同时,敲除了酿酒酵母TCA循环关键基因LSC1,但未能使己二酸产量提高.通过发酵实验,研究了生物量、副产物乙醇与己二酸产量的联系;并通过改变初始碳源浓度对乙醇和己二酸产量进行了研究,为进一步提高己二酸产率、降低酿酒酵母葡萄糖效应提供了参考依据.