SARS冠状病毒核衣壳蛋白在酿酒酵母中的表达和纯化

目的:构建重组表达质粒pYES6-N,诱导SARS冠状病毒核衣壳蛋白(nucleocapsid protein)在酿酒酵母中的表达和纯化.方法:逆转录获得SARS冠状病毒DNA片段,PCR获得核衣壳蛋白基因互相重叠的两部分片段,酶切连接成全长,在E.coli JM109中构建重组表达克隆pYES6-N,在酿酒酵母中诱导表达并纯化.结果:重组克隆pyes6-N经酶切、测序鉴定确定,插入片段大小、方向、碱基匹配与预期一致,获得一个完整的核衣壳蛋白基因,表达产物纯化后,电泳鉴定,相对分子质量近45 000.结论:成功克隆SARS冠状病毒核衣壳蛋白基因全长,并在酿酒酵母中诱导表达成功,有助于抗SARS分子疫苗的研究.
以“模式生物”——酿酒酵母(Saccharom yces cerevisiae)为载体,通过测定酵母细胞的生物量、活细胞/死细胞的计数比值以及胞外聚合物(EPS)的含量,研究了不同浓度的Cd2+(Cd2+浓度分别为0.0 mg/L、0.1 mg/L、0.5 mg/L、1.0 mg/L、2.0 mg/L、8.0 mg/L)对酿酒酵母的毒害作用.试验结果表明:当Cd2+浓度小于或等于0.1mg/L时,活细胞/死细胞的计数比值随着时间的推移分别降低了7.86和8.37,在0.5 mg/L、1.0 mg/L和2.0mg/L的Cd2+浓度下,活细胞/死细胞的计数比值则分别上升了3.35、5.64和0.89,8.0 mg/L浓度的Cd2+则会完全抑制酵母细胞的增殖,活细胞/死细胞的计数比值波动在0.86～1.11之间;同时,随着Cd2+浓度的上升,酵母细胞的生物量会逐渐减少,0.1 mg/L浓度的Cd2+对酵母细胞生物量无明显影响,0.5～8.0 mg/L浓度的Cd2+可使酵母细胞生物量比不含Cd2+的培养基分别下降了7.01％、35.14％、59.89％和96.86％;此外,0.5 mg/L和1.0mg/L浓度的Cd2+能显著刺激酵母细胞分泌更多的EPS,增幅分别为20.26％和7.54％.上述结果表明酵母细胞在一定的Cd2+浓度下可以通过提高EPS的产量来抵御Cd2+对细胞的毒性作用.
本发明属于白酒酿造技术领域，具体公开了一种糯香型白酒及其制备方法。本发明糯香型白酒主要由谷物和酒曲按一定质量比，经过混合发酵和蒸馏得到；其中，所述酒曲主要由基础谷物和中草药组分制备得到；所述基础谷物主要由糯米和麸皮按质量比2?3:1?2混合制成；所述中草药组分包括以下重量份的原料组分：菊花5?10份、陈皮5?10份、茅根4?8份、辣子3?7份、桂枝3?7份、菠萝3?7份、薄荷3?7份、金银花3?7份、茉莉花3?6份、藏红花2?6份、红枣2?5份和甘草1?5份。本发明的糯香型白酒采用特制的酒曲进行制备，感官质量高且具有一定的保健效果，同时，其制备方法简单、易于实施。
氮源是酵母生长所必需的营养物质之一,经实验分析测定发现,发酵前添加0.2%的的啤酒废酵母有利于提高苹果酒的产量和质量.苹果汁接种酵母后,于室温下(15℃)9d内酒精含量由0升为6.7%(v/v),还原糖由12.03%降为0.23%,转化率可达90%以上.
目的:优选牛膝酒炙的最佳工艺.方法:采用L9(34)正交试验设计考察炮制用酒种类、加酒量、闷润时间和炒炙时间对牛膝酒炙的影响,分别以β-蜕皮甾酮、25R-牛膝甾酮、25S-牛膝甾酮、竹节参皂苷Ⅳa和人参皂苷Ro的含量为综合评判指标,确定最优酒炙工艺.结果:牛膝最佳酒炙工艺为牛膝加10％(g/g)黄酒闷润60 min后炒炙15 min.结论:该方法操作简便,易于控制,可为牛膝酒炙的工艺规范化提供依据.
《黄帝内经》上说：“春三月，此谓发陈。”意思是说，春季的三个月，是推陈出新、生命萌发的时令。这个季节阳气生发、大地回春、万象更新、生机盎然，是一年中最好的季节，也是人体生理机能新陈代谢最活跃的时期。