一种改良的热酚法高效快速提取酿酒酵母总RNA

以酿酒酵母单倍体CEN.PK1与双倍体CEN.PK2为研究对象,利用改良热酚法,快速高效地提取酿酒酵母总RNA.结果显示应用该方法提取的酿酒酵母CEN.PK1和CEN.PK2的总RNA经分光光度计测定浓度为7.63 μg/μL和3.77 μg/μL,OD260/280分别为2.10和2.04,OD260/230分别为2.32和2.24,浓度与纯度均能达到后续分子生物学试验的要求.经PCR与荧光定量PCR检测,该方法提取的RNA无DNA污染,可作为PCR反应的模板,与Trizol方法提取RNA相比,该方法不仅浓度高并且可将提取时间由常规的2.5 h缩短为1.5 h,具有操作简单、高质、高效等优点,经多次试验证明,此方法同样适用于酿酒酵母总RNA的大量提取试验,有较高的实用价值.
目的:研究双歧啤酒对小鼠的抗疲劳效果.方法:小鼠随机分成空白对照组、实验对照组和双歧啤酒高、中、低三个剂量组,剂量分别为100、50、25 ml/kg bw,空白对照组给予蒸馏水,实验对照组给予普通啤酒,共30d.测定负重游泳时间、肝糖原(LG)、尿素氮(BUN)、血乳酸(LAC)指标.结果:高、中剂量组双歧啤酒能显著提高小鼠运动耐力以及肝糖原储备量,降低运动后血乳酸和尿素氮含量.结论:双歧啤酒具有良好的抗运动疲劳作用.
冰成沉积构造是在冰直接控制下而形成的沉积构造,冰融沉积构造是其中的一类.通过对黄河三角洲的野外地质考察,发现并描述了7种冰融沉积构造:冰融水流痕、冰成裂流痕、冰融丘(冰融痕)、冰成泥沙片、冰成泥沙笋、冰成豆粒和冰成根状构造.冰融沉积构造的形成受低温气候条件和沉积物的新鲜程度、疏松状况及饱含水等因素的控制.综合黄河三角洲现代冰融沉积构造的研究和胶莱盆地莱阳组马耳山段地层中冰融沉积构造的识别和环境解释,认为冰融沉积构造对河床、三角洲及潮坪等沉积环境和0℃左右的气候条件具有一定的指示意义.最后,系统总结了冰成沉积构造的分类.
本发明涉及酿酒技术领域，具体涉及一种果香型白酒的生产工艺；具体包括原料处理、果肉榨汁再与熟粉混合，经发酵、蒸馏制得，本发明提供的果香型白酒果香浓郁，营养丰富，口感柔和细腻，香甜适口，回味悠长。
以秋葵干燥荚果、秸秆、根系等为不同原料，利用浸泡工艺，进行了秋葵酒的研制。结果表明，采用荚果、秸秆和根系浸提，对浸提影响较大的因素是酒精度和浸提时间，料液比和浸提温度的影响较小；在酒精度50 v/v、浸提时间90 d、浸提温度20℃、料液比1∶15时为最佳组合 A2B3C1D2；采用荚果、秸秆和根系浸提，产品综合评分分别为91分、88分和88分。
[目的]以探讨参与脂滴代谢途径的一些基因缺失是否会影响细胞自噬为出发点,比较不同自噬检测方法所获得的试验结果的差异,用于优化自噬检测条件.[方法]首先用GFP标记自噬标志性蛋白Atg8以及mCherry标记脂滴蛋白Erg6并构建代表性自噬缺陷菌株,然后用普通荧光显微镜和激光共聚焦显微镜分别观察Atg8和Erg6的共定位情况.其次,利用生长表型检测和台盼蓝染色来检测磷脂基因相关突变体经氮饥饿处理后的细胞活性情况.最后,采用免疫印迹法检测磷脂合成突变体菌株cds1-DAmp经饥饿处理不同时间后细胞中GFP-Atg8的降解和prApe1的成熟情况.[结果]在营养丰富以及饥饿条件下,用普通荧光显微镜拍摄所统计出的mCherry-Erg6与GFP-Atg8定位重叠结果高于用激光共聚焦拍摄所统计出的结果.长时间氮饥饿条件下,用生长表型检测和台盼蓝染色均能检测到与脂滴形态相关基因CHO1、MRPS35、CDS1缺失会显著影响细胞的存活率;但用生长表型检测发现CAX4缺失菌株存活显著低于野生型时,用台盼蓝染色检测发现CAX4缺失细胞存活率却与野生型无显著性差异.用免疫印迹法检测CDS1缺失菌株中自噬缺陷时,通过检测GFP-Atg8的降解,氮饥饿大于4h时的CDS1缺失菌株中GFP-Atg8的降解能力显著低于野生型,但通过检测prApe1的成熟,CDS1缺失菌株中prApe1的成熟缺陷在各个时间段均可检测到.[结论]验证了酵母脂滴代谢途径中以CDS1为代表的相关基因参与了细胞自噬.不同的检测条件、方法等因素对检测结果产生较大影响,甚至会出现相反结论,建议在酿酒酵母中进行类似的自噬检测时需要同时结合多种试验方法与手段来获取数据,以便用于结论与分析.