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菌落PCR快速扩增工业酿酒酵母基因组DNA片段

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2024-07-06 阅读:492
针对工业酿酒酵母细胞破壁难和提取基因酵母组DNA费时长(2-3 h/样品)的问题,研究了SDS-微珠涡旋破壁的方法.以破壁液上清为模板进行菌落PCR扩增酿酒酵母南阳K基因组中铜抗性蛋白基因(cupl)片段和rDNA片段.结果表明,在不需要提取酵母基因组前提下,利用该方法能有效地扩增酵母基因组DNA片段,同时该方法也适用于对转基因酿酒酵母进行菌落PCR从而实现对转化子的准确和快速地鉴定筛选,是一种成本低和易于操作的适于处理大量样品的方法.
翻译起始因子eIF1A基因是蛋白合成的重要调控因子之一,在一些植物中可能参与抗逆调控过程。为了研究刚毛柽柳TheIF1A基因是否参与抗逆过程,将TheIF1A基因插入酵母表达载体pYES2中构建成重组载体,转入酿酒酵母( Saccharomyces cerevisiae)中获得重组型酵母,分别比较转TheIF1A基因酵母和转空载体对照酵母在山梨醇、H2 O2、CdCl2、CuSO4、ZnCl2、KCl、Na2 CO3、MgCl2、-20℃和53℃胁迫处理之后的存活能力。结果显示, TheIF1A基因能有效提高转基因酵母的抗干旱、盐碱、氧化、重金属及极端温度的能力,表明TheIF1A可能参与了柽柳多种抗逆调控过程。
将PCR合成的瑞氏木霉(Trichoderma reesei)β-内切葡聚糖酶I(EGI)cDNA基因片断分别插入酵母met10和pgk1启动子和终止子序列之间,构建了在不同启动子控制下,具有不同拷贝数的eg1表达分泌质粒pRS415ME、pRS415PE和pRS425PE.通过电转化使重组质粒转移至实验室酿酒酵母H158菌株中,分别得到了3株酵母转化子H1p、H2p和H1m.在3株酵母转化子中,重组β-内切葡聚糖酶I都能在酶自身信号肽序列引导下进行分泌型表达.在YPD培养基中3株重组酵母生长速率大致相同,H1m,H1p与H2p的内切葡聚糖酶活力分别为70.4,126.7和125.0 U/mL.
以自制的啤酒废水为底物,采用双室微生物燃料电池对自拟的啤酒废水进行处理,研究不同盐桥管径对废水中CODcr、NH3-N等去除率的影响,以及对微生物燃料电池的产电性能影响.试验研究结果表明,当盐桥的管径为12mm时,CODcr和NH3-N的去除率最大,分别为95.2%和71.8%,且产电性能较好,最大输出电压为308mV.
本实用新型公开了一种白酒蒸馏装置,包括甑桶和冷凝装置,所述冷凝装置包括冷凝池,所述冷凝池内环形均布设有至少一个冷凝器,所述甑桶与所述冷凝器一一对应设置在所述冷凝池外,且所述甑桶与对应的所述冷凝器之间设有蒸汽管道相连;所述冷凝池的底部设有进水口,顶部设有出水口;所述冷凝器包括位于上端的蒸汽缓冲腔和位于下端的冷凝液集液腔,所述蒸汽缓冲腔与所述冷凝液集液腔之间设有冷凝单元,所述蒸汽管道与所述蒸汽缓冲腔相连,所述冷凝液集液腔的底部设有冷凝液出液管;所述冷凝单元包括分别与所述蒸汽缓冲腔和冷凝液集液腔相通的冷凝管,所述冷凝管外套装设有冷凝介质管,所述冷凝介质管的下端设有冷凝介质进口,上端设有冷凝介质出口。
本发明所要解决的技术问题是提供一种首乌白酒及其制备方法,它由何首乌,丹参,稻壳,水组成。各原料蒸馏时的重量百分比为:何首乌44~50%,丹参9~13%,稻壳25~27%,水10~22%。通过混合、拌入糖化酶,酵母搅拌、自然发酵、取出酒糟,淌酒即得本产品。本发明的有益效果是:具备黑须发,益血气,抗衰老等作用。

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