酿酒酵母对酚类抑制物耐受性研究

通过短期驯化策略提高酿酒酵母对木质纤维素预处理产生的酚类物质的耐受性.考察酚酸对酵母的抑制作用,比较驯化菌株在酚酸中生理指标,通过流式细胞仪分析酵母细胞膜完整性.单一酚酸低浓度对酿酒酵母生长和发酵没有明显抑制作用,而高浓度抑制强烈.混合酚酸具有更强的抑制作用,特别对乙醇发酵影响显著.相比原始菌株,短期驯化菌株在混合酚酸胁迫下的生长发酵动力学参数明显提高,细胞膜保持良好的完整性.酚酸对酿酒酵母生长有直接抑制作用,短期驯化能提高酵母酚酸耐受性,这与细胞膜应激反应保持其完整性有关.
本文主要研究了脉冲电场对酵母菌细胞形态的影响,酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae CICC 1012)菌悬液在脉冲电场条件下进行处理,采用台盼蓝染色和扫描电镜观察发现,酵母菌细胞的表面粗糙度明显增强,甚至出现未复原的小凹孔.该项研究可为外源蛋白质、药物等大分子的导入提供技术支持.
该方法建立了ICP-MS在线内标法测定白酒中Pb,Mn,As,Hg,Sn五种重金属元素的方法,探索了一次测定五种元素的前处理时蒸发酒精的最佳温度,并对ICP-MS工作参数及条件进行了优化.线性范围0~100μg/L,方法的检出限均优于0.015μg/L,回收率在85%~111%,相对标准偏差(n=11)均6%.采用该方法对白酒样品进行了分析,结果表明精密度和准确度均满足痕量分析的要求.
以鲜奶为主要原料,通过发酵试验和感官评定,筛选出发酵风味好的菌株,探究奶啤饮料的工艺配方并进行奶啤稳定性研究.结果表明:利用啤酒酵母发酵,奶啤风味最好;当酵母接种量为4%,蔗糖添加量为8%,发酵温度为30℃,发酵时间为15 h时生产的奶啤饮料风味最佳,而当CMC添加量为0.5%,黄原胶添加量为0.2%时,稳定性较好.
[目的]探讨木糖结晶母液发酵特性,为开发利用木糖结晶母液提供依据. [方法]利用酿酒活性干酵母,研究发酵过程中葡萄糖、木糖、阿拉伯糖、半乳糖含量的变化以及木糖结晶母液糖组分和含量的变化.[结果]在发酵2 d以后,葡萄糖与半乳糖全部被转化,而木糖与阿拉伯糖浓度几乎不变.半乳糖的转化速度慢于葡萄糖.木糖结晶母液经12 d的发酵,葡萄糖完全转化,木糖没有明显变化,而阿拉伯糖色谱峰有所变化.发酵前,木糖结晶母液中含4种糖,木糖占56.6%;发酵后,含2种糖,木糖占81.2%. [结论]发酵后,木糖结晶母液中糖组成由4种变成2种,木糖纯度得到了很大提高.
以含有大豆Sali3-2 cDNA的重组载体为模版,扩增出SALI3-2蛋白及其缺失信号肽的SI cDNA片段,构建酵母表达载体pYES2/S、pYES2/SI以及可表达SALI3-2-His6的pYES2/SH.空载体pYES2/ct和重组载体在转化酿酒酵母INVSC1后得到相应的酵母重组子INV/CK(对照菌)、INV/S、INV/SI和INV/SH.Western blot实验结果表明,SALI3-2蛋白在酵母INVSC1中可被半乳糖诱导表达.对INV/CK、转基因的重组菌INV/S、INV/SI在无胁迫、含1.5mol/L NaCl或山梨醇培养基中的生长情况进行分析.结果表明,大豆SALI3-2蛋白及其缺失多肽SI的表达对无胁迫条件下酵母的生长没有影响,而在NaCl胁迫下可明显提高酵母转化子的耐盐能力.信号肽的缺失使SALI3-2蛋白的耐盐能力有所下降,可见信号肽对该蛋白耐盐功能的发挥有重要作用.另外,SALI3-2蛋白及其缺失多肽SI的表达不能提高酵母重组子的抗渗透能力,表明SALI3-2蛋白对细胞不具有明显的渗透胁迫调节作用.