用草本植物番茄鉴定五种柑橘类病毒

[目的]通过嫁接木本指示植物进行柑橘类病毒鉴定需要合适的季节和较长的显症时间,并且柑橘木本指示植物的遗传转化和基因功能验证体系尚不成熟,研究其与寄主间的互作较为困难.因此,寻找合适的草本鉴定和实验寄主对于更好地进行柑橘类病毒的鉴定及研究其与寄主间的互作具有重要意义.论文旨在明确中国报道的5种主要柑橘类病毒,包括柑橘裂皮类病毒(Citrus exocortis virold,CEVd)、柑橘曲叶类病毒(Citrus bent leaf viroid,CBLVd)、啤酒花矮化类病毒(Hop stunt viroid,HSVd)、柑橘矮化类病毒(Citrus dwarfing viroid,CDVd)和柑橘树皮裂纹类病毒(Citrus bark cracking viroi,CBCVd)对番茄(Solanum lycopersicum)的侵染能力,进而明确其可否作为5种类病毒的鉴别寄主或实验寄主.[方法]将5种柑橘类病毒的野生型分子变种(分别为CEVd.188,长370nt;CBLVd.032,长328 nt;HSVd.citl06,长296 nt;CVd-Ⅲ.072,长295 nt;CVd Ⅳ Ca,长285 nt)二聚体cDNA克隆质粒(克隆于pGEM-T载体),采用限制性内切酶NdeⅠ在37℃条件下进行酶切线性化处理,经琼脂糖凝胶电泳分析鉴定酶切成功后,将该含有目标片段的线性化重组质粒采用T7 RNA多聚酶在37℃条件下进行体外转录,获得类病毒RNA二聚体溶解于1％K2HPO4接种缓冲液中,机械摩擦接种Alisa Craig和Rutgers番茄(S.lycopersicum var.Alisa Craig和var.Rutgers)叶片,置于24℃温室条件下培养.接种60d后,采集新生叶片采用CTAB法提取番茄叶片总RNA,通过RT-PCR对接种的类病毒进行检测.将PCR产物经琼脂糖凝胶电泳分析后,切胶回收目标片段,与pMD18-T载体连接,热击转化大肠杆菌DH5α感受态细胞.经PCR鉴定后挑取阳性克隆进行序列测定,采用DNAMAN version 6.0软件对获得的cDNA序列进行相似性分析.[结果]线性化质粒体外转录后经琼脂糖凝胶电泳分析显示,每个质粒转录产物均可检测到目标大小的RNA条带.接种后,RT-PCR检测显示5种类病毒侵染率表现出显著差异,CEVd、CDVd和HSVd可以侵染大部分接种植株(侵染率分别为7/8、5/8和7/8).从接种成功的植株样品中对所接种类病毒后代的cDNA克隆和序列测定显示,随机测定的5-10个克隆中均能找到与接种类病毒cDNA-致的核苷酸序列,后代序列与接种序列间的相似性在99.7％以上;后代分子变异分析显示变异位点小于1 0个,变异率小于0.3％;而CBLVd和CBCVd不能侵染或侵染率很低(0或1/8).[结论]CEVd、CDVd和HSVd能够侵染Rutgers和Alisa Craig番茄,2种番茄均可以作为3种类病毒的草本鉴定和实验寄主;而CBLVd和CBCVd难于侵染Rutgers和Alisa Craig番茄.在接种的Alisa Craig番茄品种上,各类病毒接种植株均比接种缓冲液对照表现显著的矮化效果;在Rutgers植株上,仅有接种了CEVd的植株表现较对照的矮化效果.
酸度过高是野生葡萄酿酒过程中常见的问题之一.本试验研究了在不采取任何人工降酸措施的条件下,野生葡萄发酵及贮酒过程中的酸降变化规律.
本发明涉及白酒蒸馏方法，属于酿酒技术领域。本发明所解决的技术问题是提供了一种白酒蒸馏方法，该方法可以在白酒蒸馏过程中回收利用黄水。本发明白酒蒸馏方法为：采用白酒酿造蒸馏器进行蒸馏，所述的白酒酿造蒸馏器包括底锅，还包括具有釜腔的釜体，在釜体上设置有常压蒸汽管，常压蒸汽管的一端与釜腔相通，另一端与底锅的容腔相通；其中，蒸馏时甑桶放于底锅中，釜腔中按重量配比加入30～80份水、5～40份黄水、5～20份基础酒，加热釜腔使蒸气进入甑桶中蒸酒。
通过对南岭山区导线覆冰的取值分析,从而合理地确定导线覆冰设计厚度及适用区段,对降低线路造价、保证线路安全运行至关重要.
本发明涉及一种王浆蛋白酒的生产方法，属于制酒领域。目前用于制造蜂王浆的酒不能有针对性的将蜂王浆中的有效物质提取出来，使得蜂王浆酒体现出来的功效针对性不强。本发明提供一种工艺简单，生产出来的王浆蛋白酒营养价值高，且能够防止蜂王浆中的蛋白质在贮存过程中失效或变质的王浆蛋白酒的生产方法，依次包括蜂王浆称取、兑酒、调节酒精度和调味工序，其特征在于：还包括蛋白质提取、蛋白质水解、粗滤、冷冻和精滤工序，其中所述蛋白质提取工序和蛋白质水解工序依次位于蜂王浆称取工序和兑酒工序之间，所述粗滤工序位于兑酒工序和调节酒精度工序之间，所述冷冻工序和精滤工序依次位于调味工序之后。
覆冰绝缘子闪络过程中泄漏电流持续时间长,幅值变化大,用常规示波器很难测量,故据此特点设计了基于LabView的覆冰绝缘子冰闪过程泄漏电流监测系统.通过设计制作前置处理电路及LabView编程来全过程监测覆冰污秽绝缘子闪络试验中及局部电弧发展变化过程中泄漏电流,并实现了波形显示、数据存储和分析、打印输出等功能.