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  • 绿色木霉EG Ⅲ基因的克隆及其在工业酿酒酵母中的整合表达

    通过RT-PCR从绿色木霉AS3.3711中克隆得到EG Ⅲ基因,序列分析显示该基因编码序列全长为1 257 bp,编码418个aa,且自身带有21个aa的信号肽序列,与里氏木霉eg3的同源性为99.6%.将该基因连入酿酒酵母多拷贝整合型表达载体p

    2024-07-10 18:27:06
  • 酿酒酵母CICC1747醛糖还原酶基因的克隆及表达

    采用PCR技术以酿酒酵母CICC1747基因组DNA为模板扩增得到醛糖还原酶基因GRE3,插入到pET-15b载体的NdeⅠ和BamHⅠ酶切位点之间,构建了酿酒酵母醛糖还原酶原核表达载体pET-15b-GRE3.将该载体转化到大肠杆菌菌株Rosetta(D

    2024-07-10 15:35:26
  • 类黄酮异戊烯转移酶基因在酿酒酵母中的表达

    [目的]对类黄酮异戊烯转移酶基因在酿酒酵母中的表达进行研究.[方法]以粗毛淫羊藿为材料,对其类黄酮异戊烯转移酶基因(EaPT1)进行克隆,并构建重组质粒,将其转化至酿酒酵母INVSc1中表达,进行黄酮类底物粗酶检测.[结果]

    2024-07-10 12:59:15
  • 酿酒酵母BJ3505 NHX1基因突变株的构建及功能验证

    构建酿酒酵母NHX1基因单缺失突变株,验证其在酿酒酵母BJ3505抵抗逆境及液胞融合中的功能.利用同源重组技术构建BJ3505 NHX1基因的插入失活突变株BJ3505Δnhx1,并构建互补菌株BJ3505Δnhx1-C,对酿酒酵母NHX1基因在逆境

    2024-07-10 12:14:17
  • 木糖还原酶基因的克隆及其在酿酒酵母中的定向整合

    酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)是重要的乙醇生产菌株,但因缺少戊糖代谢途径而不能利用木糖,为了改良工业酿酒酵母利用半纤维素发酵生产乙醇的性能,利用分子生物学技术构建能够利用木糖的基因工程酵母。选取酿

    2024-07-10 11:50:52
  • 黑曲霉糖化酶基因克隆及在酿酒酵母中的表达

    为了以酿酒酵母S78为宿主菌异源高效表达糖化酶基因,进一步扩大糖化酶基因在工业生产上的应用.运用RT-PCR法从黑曲霉中克隆得到糖化酶基因(glaA)cDNA,去除其信号肽编码区后的序列重组到酵母表达载体pVT102U/αADH1强启

    2024-07-10 10:45:00
  • 以绿色荧光蛋白为报告基因的酿酒酵母表达载体的构建

    目的构建以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因的酿酒酵母表达载体.方法利用通用载体质粒融合系统(UPS),首先将GFP片断连入donor载体,随后在Cre酶作用下与acceptor载体融合,获得了带有GFP片断的酿酒酵母(saccharomyces cerev

    2024-07-10 00:07:08
  • 乙醇脱氢酶Ⅰ基因敲除的酿酒酵母重组菌构建的初步研究

    本实验根据酿酒酵母乙醇代谢途径,构建一株低乙醇产量的酿酒酵母基因工程菌株,以满足人们对低醇啤酒的需要.利用抗性基因筛选基因敲除突变体的方法,通过引物L1和L2扩增潮霉素B基因(两翼与酿酒酵母同源),按常规醋酸锂法

    2024-07-09 22:42:46
  • 酿酒酵母GSH Ⅰ基因的克隆、表达与结构分析

    γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(GSH Ⅰ)是合成谷胱甘肽的关键酶.通过构建GSH Ⅰ活性较高的重组菌来提高合成GSH的能力.利用PCR技术扩增获得了酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)2-10515的gshⅠ基因,构建原核表达载体pET-28

    2024-07-09 21:12:02
  • 酿酒酵母转氨酶Ⅰ基因的克隆及序列分析

    利用酿酒酵母YT0801的总DNA为模板,采用PCR技术克隆出转氨酶Ⅰ基因的DNA序列,利用生物信息学工具对其核酸序列和蛋白序列进行分析.测序结果表明DNA序列含有一个1503bp的开放阅读框,编码500个氨基酸,推测等电点为5.81,

    2024-07-09 19:02:29
  • ADK基因在酿酒酵母中的表达和ATP合成研究

    采用基因工程技术,将催化ATP合成的酶-ADK的基因克隆进表达载体YEpN181P2获得重组质粒YEpN-ADK,转化酿酒酵母GRF18后,ADK基因获得表达.用重组菌株GRF18(YEpN-ADK)发酵合成ATP其产率比对照菌株GRF18提高75%.本试验利用

    2024-07-09 18:43:55
  • 肾癌G250/MN/CAIX抗原基因在酿酒酵母中的诱导表达及意义

    [目的]观察G250抗原基因编码区cDNA全长基因片段在酿酒酵母中诱导表达情况,并初步探讨其作为肿瘤治疗中的意义.[方法]应用基因重组技术将人G250 cDNA序列克隆入酿酒酵母穿梭诱导表达载体pYES2/NT C,构建重组酵母真核表

    2024-07-09 16:57:05
  • YDL080 c基因缺失的低异戊醇酿酒酵母菌构建

    [目的]构建YDL080c基因缺失的低异戊醇生成的酿酒酵母菌。[方法]利用Cre-loxP重组系统与酵母电转化法敲除酿酒酵母中编码类丙酮酸脱羧酶的基因YDL080c,切断酿酒酵母代谢中的异戊醇生成,从而构建一株低异戊醇生成的

    2024-07-09 15:19:16
  • 基因工程策略改造产油微生物酿酒酵母的研究

    理性改造功能性油脂生产菌株,获得高油脂含量、高比例多不饱和脂肪酸(polymerase unsaturated fatty acids,PUFAs)及食品安全性的优良工程菌,将会为微生物功能性油脂的工业化生产注入新动力.产油微生物油脂积累过程中,

    2024-07-09 14:03:12
  • 可降解淀粉酿酒酵母基因工程菌的构建及其生产应用

    将酿酒酵母的rDNA片段,黑曲霉葡萄糖淀粉酶基因表达盒及G418抗性基因表达盒重组进经过改造的质粒pSP72,构建酿酒酵母整合型质粒YIp4RGAn及YIp19RGAn,转化酿酒酵母实验室菌株GRF18、生产菌株JL108、SD和JM,获得能高效表

    2024-07-09 13:04:28
  • 非诺贝特对酿酒酵母基因表达谱影响的研究

    目的:探讨非诺贝特对酿酒酵母基因表达谱的影响,在基因表达水平上分析其作用机理。方法:采用非诺贝特(100μg/mL)处理酿酒酵母90min后,抽提细胞RNA进行反转录荧光标记cRNA,与基因表达谱芯片进行杂交,用激光扫

    2024-07-09 12:15:12
  • 蛇龙珠等酿酒葡萄品种羧酸酯酶基因片段的SNP分析

    [目的]利用单核苷酸多态笥( SNP)分析蛇龙珠等酿酒葡萄的单核苷酸多态性及遗传亲缘关系,为今后研究酿酒葡萄的抗性机制以及培育抗病性葡萄提供参考。[方法]以酿酒葡蛇龙珠8个新株系(E01~E08)、品丽珠、赤霞珠为

    2024-07-09 01:18:10
  • 糖化酵母糖化酶基因在酿酒酵母中的克隆与表达

    [目的]使酿酒酵母高效表达糖化酵母糖化酶基因.[方法]利用PCR技术从糖化酵母中扩增出大小为2700 bp左右的带有启动子的糖化酶基因STA1.通过限制性内切酶BspDI与Acc65I双酶切,将目的基因STA1连接到穿梭质粒pRS416中构建

    2024-07-09 00:55:13
  • 西伯利亚蓼谷胱甘肽转移酶和半胱氨酸合成酶基因在酿酒酵母中的共表达

    谷胱甘肽转移酶和半胱氨酸合成酶在清除活性氧(reactive oxygen species,ROS)中起重要作用.采用0.36 mol·L-1NaHCO3对西伯利亚蓼(Polygonum sibiricum)进行胁迫处理,荧光定量PCR分析表明这2个基因的表达受盐胁迫强烈

    2024-07-08 22:14:15
  • 基因crtI对重组酿酒酵母β-胡萝卜素产量的影响

    本文研究了在一株表达红法夫酵母色素合成相关基因crtE、crt YB、crtI和酿酒酵母HMG1功能域的重组酿酒酵母菌株Sc-EYBIH中,再表达一个拷贝crtI基因,对重组酵母Sc-EYBIH中β-胡萝卜素产量的影响.结果表明再表达crtI基因

    2024-07-08 19:11:27
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