利用染色体步移技术对深海真菌Dichotomomyces cejpii中胶霉毒素的生物合成基因GliG、GliI和GliO启动子进行克隆,并将其核心区域导入pGL3-basic荧光素酶报告基因载体,通过荧光强度分析发现GliG的启动子转录活性最强.进
2024-07-24 22:10:44采用RT-PCR方法克隆到绿色木霉AS3.3711的葡聚糖内切酶Ⅰ(EGⅠ)的cDNA序列,测序后构建到酿酒酵母诱导型表达载体pYES2上,转化酿酒酵母,转化子用2%的β-D-半乳糖进行诱导,用Northern杂交、刚果红染色法和CMC糖化力法分
2024-07-24 15:45:16用PCR方法从酿酒酵母AH109中扩增出α-半乳糖苷酶MEL1基因片段,与乙醇脱氢酶组成型启动子重组后构建成表达重组质粒pGAD-GAL.将重组质粒pGAD-GAL转化不带α-半乳糖苷酶基因的酿酒酵母后,在预先涂布有X-α-Gal的亮氨酸
2024-07-24 07:10:00从长枝木霉3.1029基因组中克隆了内切葡聚糖酶EG1基因,该基因全长1566 bp,由3个外显子2个内含子组成,编码461个氨基酸,编码蛋白的N端为22aa组成的信号肽.采用重叠PCR法获得无内含子的内切葡聚糖酶基因eg1,构建成pYE-Le
2024-07-23 18:38:13采用RT-PCR方法克隆到绿色木霉(Trichoderma viride)AS3.3711的葡聚糖内切酶Ⅴ(EGⅤ)的cDNA 基因.测序后构建到酿酒酵母诱导型表达载体pYES2 上,转化酿酒酵母,同时研究了超声波处理对酵母完整细胞转化的影响.转化子用2
2024-07-23 11:05:11以旱柳Salix matsudana及东南景天Sedum alfredii为实验材料,利用改进的SMART(switching mechanism at 5'end of RNA transcript)技术分别构建了旱柳盐胁迫和东南景天氯化镉胁迫后的全长cDNA文库,把文库包装到酵母
2024-07-23 03:42:51[目的]解决酿酒酵母不能发酵或利用木糖的问题,以期选育出高效转化秸秆生产乙醇的菌株.[方法]将来自近平滑假丝酵母(Candida parapsilosis)的木糖还原酶基因(xyl1),热带假丝酵母(Candida tropicalis)的木糖醇脱氢酶基
2024-07-22 23:16:57采用分光光度计比浊法测定酿酒酵母INVSc1的生长曲线,确定菌体生长规律;并以此为依据,制备酿酒酵母感受态细胞,进行葡萄芪合酶基因酿酒酵母重组质粒的转化;采用菌落PCR法快速鉴定阳性重组子,并进一步检测重组质粒在重
2024-07-22 20:11:53克隆毕赤氏酵母(Pichia stipitis)木糖还原酶基因XYL1,将其连接到适用于酿酒酵母工业菌株的多拷贝载体pYMIKP中,构建得到表达质粒pYMIKY-XYL1,转化酿酒酵母工业菌株Saccharomyces cerevisiae 6508.利用G418筛选转化子,
2024-07-22 12:03:00根据酵母整合质粒的设计要求,PCR扩增2.2 kb rDNA片段,导入酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)整合载体pYD1中,设计并合成适合在酵母中表达的鲑鱼降钙素(Salmon Calcitonin),以此为目标基因,构建适合酿酒酵母多拷贝整
2024-07-22 00:08:51目的应用RD-PCR技术分离酵母基因.方法首先提取酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)总RNA,纯化mRNA;然后,反转录成双链cDNA;再用限制性内切酶Sau3AI酶切,在酶切片段上加上接头后,用通用引物U进行第一次PCR扩增,以这一
2024-07-21 15:31:16文中采用醋酸锂转化法,将一段目的基因转入到酵母体内,破坏酵母乙醇脱氢酶Ⅱ基因的表达.通过对目的基因的扩增和乙醇脱氢酶Ⅱ酶活检测验证基因敲除情况,并通过传代抗性试验验证突变株遗传稳定性良好.目的分析早期酒依
2024-07-20 21:57:10利用通用载体质粒融合系统UPS(univector plasmid-fusion system)构建出了以GFP(绿色荧光蛋白)为报告基因的酵母表达载体,经PCR、电泳、测序等手段证明了构建的准确性,同时验证了UPS的高效性及简便性.本实用新型涉及一
2024-07-20 17:23:49研究蛋白质O-甘露糖转移酶(Protein O-mannosyltransferase,PMT)家族中PMT3基因缺失,以及PMT1与PMT3双基因缺失对酵母细胞复制性寿命的影响.采用一步基因置换法构建PMT3基因缺失酵母菌株(pmt3Δ),基于基因同源重组的原
2024-07-20 11:00:36SNF4基因编码的Snf4p具有调节Snf1复合体的蛋白激酶活性功能,根据已知的SNF4基因序列设计引物扩增获得S.cerevisiae YS2的SNF4基因完整序列.序列分析表明,SNF4基因的开放阅读框为969bp,编码322个氨基酸残基.应用生物信
2024-07-20 06:00:38ω3脂肪酸去饱和酶(fatty acid desaturase,FAD)能使藻类细胞产生一系列具有高附加值的ω3脂肪酸.在已克隆到缺刻缘绿藻(Myrmecia incisa Reisigl)的ω3FAD基因基础上,为进一步了解其功能,本研究首先利用反转录PCR(RT-
2024-07-20 03:19:45花生油中亚油酸(LA,C18:2Δ9,12)含量很高,为了研究花生Δ12脂肪酸脱氢酶(Δ12 FAD)的功能,用RT-PCR方法从花生未成熟种子中扩增出AhFAD2B的cDNA,连接到酵母表达载体p416中,并转化酿酒酵母K601,得到工程菌Kp4AFAD2B.气
2024-07-19 07:46:01利用西北农林科技大学葡萄酒学院筛选出的酒酒球菌(Oenococcus oeni)优良菌系SD-2a的包含苹果酸-乳酸酶基因(mleA)和苹果酸通透酶基因(mleP)约2.6 kb的基因片段,并以PGK1强启动子和ADH1终止子为调控元件,以酵母-大肠杆
2024-07-19 05:09:39目的研究新型的防治鼠疫的基因疫苗.方法将鼠疫杆菌F1抗原结构基因caf1构建至pHSS6-mTn-3xHA/lacZ转座文库质粒中,将此重组质粒经Not I酶切线性化,然后以醋酸锂法转化至酵母细胞中进行同源重组,再以尿嘧啶缺陷型培养基
2024-07-19 04:02:23目的:利用自己构建的酿酒酵母全基因组DNA芯片,分析盐酸小檗碱处理酵母细胞后对其整个基因表达谱的影响,在基因水平上分析盐酸小檗碱的药理机制.方法:用盐酸小檗碱(100μg/ml)处理酵母细胞90min后,抽提细胞的RNA进行反
2024-07-19 02:49:27周一至周五
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