为了提高酵母菌的y-氨基丁酸产量,本研究以十六烷基三甲基溴化铵法(hexadecyl trimethy ammonium bromide,CTAB)提取的酿酒酵母28基因组DNA为模板,扩增得到序列长度为1 758 bp的GAD1基因,经比对与S.cerevisiae S288c的
2024-07-18 23:42:20调控嘌呤代谢途径关键酶基因表达水平,会影响经AMP→ ADP→ ATP而生成的cAMP(cyclic adenosine mnophosphate,cAMP)产量.将酿酒酵母编码磷酸核糖焦磷酸合成酶基因PRS1和PRS3、磷酸核糖焦磷酸氨基转移酶基因ADE4、腺苷
2024-07-18 22:10:20目的在酿酒酵母AH109中表达柯萨奇病毒B3型VP1基因,并检测VP1蛋白对报告基因的转录自激活作用.方法用乙酸锂法将重组柯萨奇B3病毒VP1基因的细菌-酵母菌穿梭载体pGBKT7-VP1转化酵母菌.通过表型鉴定、PCR法验证质粒导入
2024-07-18 19:56:14通过重叠延伸PCR(gene splicing by overlap extension,SOE-PCR)扩增黄曲霉寡聚-1,6-葡萄糖苷酶基因和酿酒酵母α-信号肽序列,定向重组到整合型表达载体pδRCMB中,并在CICC1346中实现分泌表达;然后通过同源建模、利用
2024-07-18 16:25:08L-异亮氨酸是人体必需氨基酸之一,具有很大的商业价值.在谷氨酸棒杆菌中,合成一分子L-异亮氨酸需要消耗四分子NADPH.因此,提高胞内NADPH浓度是提高L-异亮氨酸产量的重要手段之一.在乳糖发酵短杆菌JHI3-156中过量表达酿
2024-07-18 13:26:12目的 构建牛乳铁多肽(Lactoferricin B)的真核表达质粒pYES2/Lactoferricin B,实现其在酿酒酵母S.cerevisiae中的表达,并初步检测其不同变异的体外抗菌活性.方法 通过分别合成Lactoferricin B基因两条单链的部分序列,
2024-07-18 11:41:56利用不同强度的启动子调控木糖代谢关键酶活性,构建稳定代谢葡萄糖和木耱产乙醇的重组酿酒酵母.以本实验室专利菌株Saccharomyces cerevisiae Y5为宿主菌,将树干毕赤酵母Pichia stipitis CBS6054的木糖还原酶基因XYL1
2024-07-18 08:41:56与植物体内合成路径不同,微生物体内合成咖啡碱存在一条以黄嘌呤为底物,利用鸟嘌呤脱氨酶催化鸟嘌呤生成黄嘌呤有效合成咖啡碱的新途径.为克隆鸟嘌呤脱氨酶的基因,构建可高效合成黄嘌呤的原核表达载体并对外源蛋白活性
2024-07-18 06:59:06从黑曲霉(Aspergillus niger)克隆木聚糖酶基因xynB,利用重叠延伸PCR法去除其中的内含子.将该基因与质粒pYES2连接,构建真核表达载体,用醋酸锂化转法导人酿酒酵母(Sacharom yces cerevisiae)INVSC1菌株表达.利用α信号
2024-07-18 03:24:12以酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)基因组DNA为模板,通过PCR扩增得到蔗糖酶基因(suc 2),并将其克隆到表达载体pSE380中,将得到的重组质粒pSE-suc 2转化进E.coli BL21中,利用镍金属螯合层析方法分析测定其酶学性质.
2024-07-17 22:10:38目的研究酵母mRNA在哺乳动物细胞中的翻译表达.方法半乳糖诱导GFP基因在酿酒酵母细胞中表达,提取其mRNA,RT-PCR鉴定,并以脂质体为介导,对血管内皮细胞HUVFC以及绿猴肾细胞COS-7进行体外转染.结果被转染HUVEC和COS-7细
2024-07-17 21:32:11用L-山梨糖诱导绿色木霉(Trichoderma viride)AS3.3711纤维素酶基因的转录,提取其总RNA反转录获得cDNA.PCR扩增葡聚糖内切酶Ⅰ(EG Ⅰ)和葡聚糖内切酶Ⅲ(EG Ⅲ)的cDNA基因,将其克隆到酵母载体中,构建产生纤维素酶的酿酒
2024-07-17 19:02:59将PCR合成的瑞氏木霉(Trichoderma reesei)β-内切葡聚糖酶I(EGI)cDNA基因片断分别插入酵母met10和pgk1启动子和终止子序列之间,构建了在不同启动子控制下,具有不同拷贝数的eg1表达分泌质粒pRS415ME、pRS415PE和pRS425
2024-07-17 16:34:49用定向进化的一种新方法,对野油菜黄单胞菌(Xanthomonas campestris pv.campestris)的α-淀粉酶基因(XAMY)进行PCR体外诱变后获得了一个编码的酶活性提高的突变基因,将其克隆到由rDNA序列介导的酵母整合型表达载体pHBM
2024-07-17 12:39:47将酿酒酵母3-磷酸甘油脱氢酶基因GPDH1的编码序列构建到表达载体pPIC3.5K中,利用电转化法将构建好的表达载体转入巴斯德毕赤酵母中,利用含有G418的YPD平板筛选到两个阳性转化子,通过分子生物学及外源蛋白表达实验证明,
2024-07-17 10:09:30目的构建S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因工程菌,为酶促转化法生产S-腺苷甲硫氨酸奠定基础.方法应用PCR技术从S-腺苷甲硫氨酸高产酿酒酵母染色体DNA中扩增得到S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因sam2,将其克隆至表达载体pT7-7,转化大
2024-07-17 07:32:42△12-脱饱和酶是亚油酸合成的关键酶,为提高△12-脱饱和酶的活性,本研究利用RT-PCR对Mucor sp.EIM-10的△12-脱饱和酶cDNA进行克隆,并导入pYES2.0质粒中,构建重组表达载体.运用醋酸锂转化法将重组质粒导入酿酒酵母,成
2024-07-17 03:38:54目的:以整合型载体pRS303K为框架,以来源于拟南芥的4-香豆酰辅酶A连接酶基因(4cl)和巨峰葡萄的白藜芦醇合酶基因(rs)为目标基因,采用一步等温法构建了表达白藜芦醇的整合型酵母表达载体pRS303K-T4C-TRC.方法:采用LiAc/
2024-07-17 00:51:46将树干毕赤氏酵母(Pichia stipitis)木糖还原酶基因XYL1连接到适用于酿酒酵母工业菌株的多拷贝整合载体pYMIKP中,构建得到表达质粒pYMIKP-XYL1,转化酿酒酵母工业菌株Saccharomyces cerevisiae6508.在G418平板上筛选转
2024-07-16 14:22:42【目的】探索益生性酿酒酵母菌对绵羊瘤胃上皮细胞β-防御素-1（sheep beta-defensin-1, SBD-1）表达的调节作用，为在分子水平上揭示益生菌对防御素的调控机理提供一定的理论基础及依据。【方法】首先将新鲜的绵羊瘤
2024-07-16 11:31:06周一至周五
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