树干毕赤酵母木糖还原酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

根据NCBI中的木糖还原酶基因序列设计引物,利用高保真聚合酶克隆树干毕赤酵母木糖还原酶基因,加A后克隆到质粒pGM-T中,测序验证.然后将目的基因克隆到舍有强启动子的穿梭表达载体p424GPD中,构建含有XYL1基因的重组质粒p424GPD-XYL1.将p424GPD-XYL1转化到大肠杆菌中,提取总蛋白,聚丙烯酰胺凝胶电泳分析.酶活测定确定木糖还原酶基因XYL1在大肠杆菌中得到活性表达,表明表达载体构建成功.表达载体的成功构建为后续构建重组酿酒酵母利用木糖发酵奠定基础.
苏啤3号在江苏沿海地区表现为优质、高产、高效、抗病,在栽培技术上应立足通过提高全群体质量,增加生物学产量,达到提高经济产量和籽粒品质的目标.即要适期播种,合理密植,合理灌溉,科学施肥,防治病虫草害,同时应及时收获入库以保证达到优质、高产、高效的目的.
目的：以不同温度处理爱格丽葡萄原料，寻找增加爱格丽干白葡萄酒香气的最适温度。方法：以白色酿酒葡萄品种爱格丽为原料，16℃处理为对照，分别在4、－8、－20、－32℃条件下进行低温处理，采用小容器酿酒规范酿制葡萄酒并测定葡萄酒的理化指标，搅拌棒吸附萃取（stir bar sorptive extraction，SBSE）提取葡萄酒中的香气成分，再通过热脱附-气相色谱-质谱联用仪来定性和定量分析葡萄酒的香气成分，用SPSS 19.0软件进行香气成分的主成分分析（principal component analysis，PCA），8名经过培训的感官品尝小组成员对酒样进行感官评价。结果：低温处理能促使葡萄酒中香气成分种类的增加和含量的提高。结论：－8、－20℃低温处理葡萄可以显著提高爱格丽干白葡萄酒的香气质量，可在一定程度上使葡萄酒的香气更加浓郁。
本文论述了白酒的一些基本特征,依据其香型可分为酱香型,浓香型等,并对白酒中的香气成分进行剖析,指出酯类,醇类,酸类,醛类为其骨架成分,这些成分的平衡关系到白酒的质量,最后,对于白酒的品评,我们可以利用视觉,嗅觉,味觉对其评价,现在,全国已逐步培养和形成了一支感观检验产品的技术队伍, 使中国白酒评酒方法更加科学化.
根据裂殖酵母的β-葡萄糖苷酶的基因序列和酒精酵母菌表面展示质粒载体pYD1上的多克隆位点设计引物,从裂殖酵母中提取总RNA,然后反转录扩增得到β—葡萄糖苷酶基因（bglA）,把该基因连接到表面展示质粒载体pYD1上,成功构建了重组质粒pYD1-bglA,并转化用于表面展示的酵母EBY100菌株中,得到酵母转化子,提取酵母菌的DNA通过PCR扩增证实了β-葡萄糖苷酶基因已整合到酵母基因组中.以不含载体和含空载体的酵母菌为对照,加2％ (w/v)的半乳糖诱导48h后,利用免疫荧光法在荧光显微镜下检测到了来源于裂殖酵母的β—葡萄糖苷酶展示在酵母菌细胞表面,并对其酶学性质进行分析研究.
通过响应曲面法(response surface methodology,RSM)研究了温度、磁场强度及曝磁时间这三个磁场处理的不同因素,对于由酿酒酵母中分离出的超氧化物歧化酶(EC 1.15.1.1)活性效果的影响.这种多变量统计方法可用于进行酶分析,并可研究体系内不同变量的交互作用,建立了可用于预测实验数据的二次多项式模型.失拟项不显著,决定系数(R2)大于94%.根据模型优化出可以取得最大酶活性的工艺参数为:温度15.5 ℃,磁场强度0.95 T, 曝磁时间64.5 min.