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TrxS基因的表达及其对大麦种子淀粉酶活性的影响

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2024-06-24 阅读:234
[目的]分析TrxS基因对大麦种子发芽及淀粉酶活性的影响,为TrxS基因对大麦种子代谢的调控提供了理论依据.[方法]以转TrxS基因啤酒大麦株系为材料,从分子水平和生理指标进行分析.[结果]实时荧光RT-PCR检测证明TrxS基因在RNA水平上能够表达;转基因大麦籽粒α-淀粉酶和β-淀粉酶活性明显提高,发芽1-5d转基因大麦种子α-淀粉酶活性比对照分别增加5.86%、75.24%、118.51%、71.02%和22.99%,β-淀粉酶活性分别比对照增加19.29%、14.68%、35.47%、23.62%和2.67%;种子的发芽能力提高.[结论]TrxS基因能够促进种子发芽.
以菠萝皮渣为主要原料、果酒酵母和沪酿1.01醋酸菌粉为菌种,采用半固态发酵和二次补糖工艺,对菠萝皮渣酒精发酵和醋酸发酵工艺进行研究,以确定最优酿造工艺参数和实现菠萝皮渣果醋的高效生产.结果表明:菠萝皮渣酒精发酵条件为酵母添加量0.3%、发酵温度22℃、糖度16°Brix、pH3.5、发酵时间6d;醋酸发酵最佳工艺条件为添加的葡萄糖质量分数2%、初始乙醇体积分数8%、发酵温度29℃、醋酸菌粉添加量0.09%、发酵时间3~4d,得到总酸量(以醋酸计)达6.78g/100g的菠萝果醋半固态混合物,醋酸转化率为82.5%.经浸泡、过滤和陈酿1~2个月后,所得菠萝果醋成品总酸含量(以醋酸计)为3.672g/100mL,色泽金黄,清亮透明,既有酸香,又有菠萝果香,口味柔和爽口.半固态果醋发酵法与液态果醋发酵法相比,能明显提高总酸产量和缩短发酵时间.
衰老研究是近来国内外的一个研究热点,酿酒酵母(Saccharomy cescerevisiae)作为低等单细胞真核生物,其寿命有复制型寿命和时序型寿命之分,相对哺乳动物来说可以便捷地进行寿命测定,使得酿酒酵母成为寿命和衰老研究的模式生物.以基因同源重组技术为基础构建酿酒酵母突变菌株,检测酵母细胞的复制型寿命和时序型寿命是目前寿命研究中的经典方法.本文着重介绍酵母突变菌株的构建方法,包括单基因缺失、双基因缺失和基因过表达;酵母的复制型寿命、时序型寿命的检测方法;酵母寿命调节机制的研究进展.
优质葡萄酒的生产迫切需要具有产区特征,能体现葡萄酒特色风格的优良酵母菌种.以新疆霞多丽葡萄自然发酵醪为材料,采用选择性培养基筛选本土酵母菌,经WL鉴别培养基确定菌属来源,并对其发酵特性进行研究.结果显示:筛选的10株菌均为酿酒酵母,通过对本土酵母与商业酵母的发酵力及耐受能力(SO2、酒精度、酸和高糖)的比较,选育3株酵母(XXF2、XXF3和XXF10)用于酿造霞多丽干白葡萄酒.对酒样指标、主要挥发物和香气组分进行分析,表明本土酵母XXF3的发酵指标较好,部分指标优于商品化酿酒酵母,尤其是苯乙醇含量达76.54 mg/L,是商品酵母RHST发酵酒样的7倍多,具备工业化发酵应用潜力.
本发明公开一种白酒丢糟分质利用方法,涉及一种白酒酿造方法,为一种白酒丢糟高值化综合利用和清洁转化方法,含水60 wt.%的新鲜白酒丢糟经过干燥至含水10~40 wt.%,将得到的干燥后白酒丢糟中的稻壳和谷物发酵残余物进行分质/分离,得到富营养部分和残余部分。富营养部分经过加工后制备高附加值动物饲料;残余部分主要成分为稻壳,直接燃烧生产蒸汽用于白酒蒸馏,燃烧烟气经过净化处理后直接排放,燃烧剩余的飞灰经过加工后制备高附加值肥料。白酒丢糟分质利用方法根据白酒丢糟中稻壳(无营养成分)和谷物发酵残余物(富含营养成分)性质和特点分别进行针对性利用,最大程度上保证了白酒丢糟中各个组分的高效转化和高值化利用,达到100%完全转化利用。
为了利用转基因技术在酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae中生产二十二碳六烯酸(DHA,22∶6A4,7,10,13,16,19n-3),构建了同时含C20-△5脂肪酸碳链延长酶(TFD5)和C22-△4脂肪酸碳链脱饱和酶(FAD4)基因的共表达质粒pYTFD5-FAD4.该质粒是通过基因重组的方法,使脂肪酸碳链延长酶与脱饱和酶基因置于各自启动子和终止子下获得的.共表达质粒pYTFD5-FAD4转化酿酒酵母所得到基因工程菌,在添加终质量分数为2%的半乳糖,终体积分数为1%的NP-40和0.3 mmol/L的底物二十碳五烯酸(EPA,20∶5△5,8,11,14,17n-3)下进行诱导,可直接转化二十碳五烯酸(EPA,20 ∶ 5△5,8,11,14,17n-3)生成二十二碳五烯酸(DPA,22 ∶ 5△4,7,10,13,16n-3)和二十二碳六烯酸(DHA,22 ∶ 6△4,7,10,13,16,19n-3).

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