高温敏感型酵母的选育及其自溶物研究

为促进酵母自溶,提高酵母自溶物活性物质含量和抗氧化活性,以啤酒酵母、面包酵母和葡萄酒酵母为出发菌株,进行常温等离子诱变,通过5-溴-4-氯-3-吲哚基-磷酸盐平板筛选,获得了3株高温敏感型突变菌P-510、A-14和D-12.突变菌对高温敏感,在37℃下具有较好的自溶能力,自溶物中β-葡聚糖含量增加,且抗氧化活性提高.该研究筛选得到的高温敏感型酵母具有功能性食品的应用前景.
检测26种红色酿酒葡萄浆果中总酚、总黄酮、花色苷、白藜芦醇和黄酮醇含量.以DPPH自由基法评价其体外抗氧化能力,分析其酚类物质含量和抗氧化活性的相关性.根据酚类物质含量,采用系统聚类法对26种酿酒葡萄进行分类.结果表明:26种酿酒葡萄中酚类物质含量及抗氧化能力有明显的差异;各酚类物质含量与抗氧化活性呈显著或极显著的相关性;对26个酿酒葡萄品种聚类分析,筛选出4个抗氧化物质含量丰富的酿酒品种——巴柯、宝石解百纳、蛇龙珠和黑塞比尔.
将脯氨酰内肽酶(PEP)添加在啤酒后酵液中,通过冷混浊实验分析脯氨酰内肽酶对啤酒非生物稳定性的影响.结果表明,添加5mg/L的脯氨酰内肽酶就能有效地提高啤酒的非生物稳定性;采用75%硫酸铵沉淀啤酒蛋白,进行SDS-PAGE电泳分析,结果显示,啤酒蛋白电泳图谱的分布主要表现为8～14.4 ku的窄带和35～45 ku的宽带,而经脯氨酰内肽酶处理的啤酒蛋白电泳图谱中8～14.4 ku的条带消失,说明此蛋白被脯氨酰内肽酶水解.
本文介绍了一种采用FFAP键合毛细管柱直接进样分析白酒香味组分的方法,一次进样可对包括有机酸的高级脂肪酸乙酯在内的57个组分进行定量测定,结果重现性良好.文中介绍了白酒中高级脂肪酸乙酯的分析结果,并报道了白酒中存在两种不同异构体的2,3-丁二醇和1,2-丙二醇及其测定结果.
为探寻高压脉冲电场对果汁中微生物的杀灭情况,揭示亚损伤微生物的存在及其影响因素.以草莓汁为原料,研究了不同处理条件下,高压脉冲电场对草莓汁中大肠杆菌和酿酒酵母损伤亚致死细胞产生的影响.结果表明,草莓汁中大肠杆菌亚致死细胞数目受高压脉冲电场处理条件的影响较为显著,在一定处理条件下(25kV/cm、200μs、10℃)大肠杆菌亚致死对数值最高达到1.339,亚致死细胞数目较多;但酿酒酵母亚致死情况受处理条件的影响较小,且亚致死对数均低于0.4,亚致死细胞产生数目较大肠杆菌少.
酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)是重要的模式真核微生物,广泛用于基础研究和工业发酵.基于CRISPR/dCas9系统开发的转录调控方法具有可编程、多重性和正交性等优点,在酿酒酵母的基因调控、功能基因组学、代谢工程等研究领域具有巨大潜力.本文关注酿酒酵母中CRISPR/dCas9基因转录调控工具的研究进展,阐述了不同转录调节结构域对dCas9或gRNA活性的调节,设计与优化dCas9和gRNA表达的方法,影响CRISPR/dCas9系统转录调控效率、特异性和通量的靶向性因素,最后总结了该工具在酿酒酵母代谢工程中的应用,并对该技术的未来发展提出了展望.