酿酒酵母rav2基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

RAVE(regulator of the H+-ATPase of the vacuolar and endosomal membranes)复合物由Ravl p,Rav2p和Skplp 3个亚基组成.将酿酒酵母中的rav2基因克隆到表达载体pETDuet-1中,构建重组质粒pETDuet-R2,并转化入大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达.通过IPTG诱导,SDS-PAGE分析重组菌在诱导后表达出目的蛋白.目的蛋白经Ni-NTA凝胶纯化后再经质谱进一步验证确定为酿酒酵母的Rav2p蛋白.目前国际上还没有有关Rav2p的结构和性质以及RAVE亚基之间相互关系的研究.重组质粒pETDuet-R2的成功构建以及Rav2p的可溶性表达为研究RAVE亚基之间的相互作用以及V-ATP酶的活性调节机理打下基础.
以椪柑果汁为原料,酿酒高活性干酵母为发酵菌种,采用液态发酵法酿造果酒.在单因素试验的基础上,通过正交试验优化发酵工艺条件.其较优工艺条件为:接种量1.25g/L、糖度22%、初始pH3.6、发酵温度26℃、发酵时问8d,在此工艺条件下,柑果酒酒精度为9.5%,色泽金黄、清亮透明,有独特的柑果香,适合扩大生产.
以来源于葡萄天然发酵液的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、乳酸明串珠菌(Leuconostoc lactis)和植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)制备一种优良的新型天然复合发酵剂以提高面包的烘焙品质.发酵剂中3株菌的最适配比为1∶1.5∶1.5,此时面包比容和硬度均优于普通酵母面包;采用质构仪(texture anylyzer,TA)、差示量热扫描仪(differential scanning calorimetry,DSC)以及固相微萃取-气相色谱-质谱联用(solid phase micro-extraction-gas chromatographic-mass spectrometry,SPME-GC-MS)技术,考察天然复合发酵剂面包的老化性能及风味.结果表明,天然复合发酵剂发酵能显著降低储藏期内面包芯硬度和老化焓,延缓面包老化,面包中挥发性风味物质的种类增加1 1种,相对含量提高4.81％;天然复合发酵剂在4℃储藏90 d后菌株存活率仍有81.78％.此发酵剂具有活菌数高、发酵能力强、货架期长且能显著改善面包品质和风味的优点.
[目的]为大规模利用山葡萄“双红”酿造干红酒提供理论依据.[方法]采用热浸提发酵工艺对山葡萄品种“双红”进行酿造试验.[结果]热浸提酿造的最佳工艺条件为:酒精发酵温度为30℃,发酵液pH为3.4,酵母接种量为6％；与传统酿造工艺相比,热浸提酿造工艺生产葡萄酒,其干浸出物、残糖、酯和色度、花色素均高,分别为29.1、29.0、1.26 g/L和5.26L、1 241 mg/L.[结论]应用此工艺可以大规模酿造山葡萄酒.
为了经济高效地利用餐厨垃圾发酵产微生物油脂,采用杯罐实验对餐厨垃圾原液进行热预处理、酸碱预处理和氧条件预处理,以探求酿酒酵母菌 S.cerevisiae 发酵产微生物油脂的最佳预处理条件。试验结果表明,餐厨垃圾原液热预处理的最佳温度为60℃,60℃温度下预处理2 h 后,餐厨垃圾水解液中的还原糖百分数和氨基酸态氮含量达到最大,分别为3.7804%和0.539 mg/mL；pH 值为[2,11]的酸碱预处理中,pH值为8时效果最佳,此条件下还原糖百分数和氨基酸态氮含量分别为3.2104%和0.889 mg/mL；相对于好氧条件,餐厨垃圾原液在兼氧条件下处理24 h 还原糖百分数和氨基酸态氮含量均较大,其值分别为3.221%和0.56 mg/mL。在试验获得的最佳预处理条件下,采用 Saccharomyces cerevisiae As2.516作为供试菌株,以预处理后的餐厨垃圾水解液加入量90%(V/V )、搅拌速率150 r/min、通气量2.5 L/min、发酵周期7 d 为基础发酵条件,进行1 L 发酵罐发酵,获得油脂产率为26.86%。
取啤酒酵母提取物按高剂量组(4.50 g/kg体重)、低剂量组(2.25 g/kg体重)对大鼠灌胃给药(分别为临床人用剂量的50和25倍),给药60 d后测试大鼠体重、血常规、生化及病理组织学观察.结果:大鼠体重、血常规、血液生化、脏体比指标及病理组织变化均属正常,其中高、低剂量组红细胞、血红蛋白、总蛋白高于对照组且差异显著(P＜0.01,P＜0.05),停药15 d后其各项指标即恢复正常.提示该提取物具有治疗贫血和免疫功能低下作用;长期服用无毒副作用,安全范围广.